| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·IL-2 的研究进展 | 第10-14页 |
| ·IL-2 的发现及命名 | 第11页 |
| ·IL-2 的结构与产生 | 第11页 |
| ·IL-2 受体的研究 | 第11-12页 |
| ·IL-2 的理化特性和生物学活性 | 第12-13页 |
| ·IL-2 的种属特异性 | 第13页 |
| ·IL-2 活性的检测 | 第13-14页 |
| ·IL-2 的应用 | 第14页 |
| ·干扰素的研究进展 | 第14-18页 |
| ·干扰素的发现 | 第15页 |
| ·干扰素的性质和分类 | 第15页 |
| ·干扰素的产生与诱导 | 第15-16页 |
| ·IFN 的基因结构 | 第16页 |
| ·IFN-γ的分子结构与生物学作用 | 第16-17页 |
| ·IFN 抑制病毒复制的作用机理 | 第17-18页 |
| ·IFN 的应用和发展趋势 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·菌种与质粒 | 第20页 |
| ·引物 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·犬脾淋巴细胞的制备 | 第22页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第22页 |
| ·cDNA 的合成 | 第22页 |
| ·IL-2 和IFN-γ基因片段的克隆与序列分析 | 第22-25页 |
| ·IL-2 与IFN-γ基因原核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的高效表达及纯化 | 第26-28页 |
| ·蛋白的复性及生物活性检测 | 第28-30页 |
| 3 结果 | 第30-39页 |
| ·重组质粒的双酶切及PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·CaIFN-γ-T 及PJLA605-CaIFN-γ重组质粒鉴定 | 第30页 |
| ·CaIL-2-T 及PJLA605-CaIL-2 重组质粒鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒克隆基因的序列分析 | 第31-32页 |
| ·重组质粒IFN-γ基因的序列分析 | 第31页 |
| ·重组质粒IL-2 基因的序列分析 | 第31-32页 |
| ·各种动物IL-2 及IFN-γ基因的同源性比较 | 第32页 |
| ·重组蛋白的表达及最佳表达时机的确立 | 第32-34页 |
| ·工程菌的高效表达 | 第34-37页 |
| ·IFN-γ工程菌的高效表达 | 第34-35页 |
| ·IL-2 工程菌的高效表达 | 第35-37页 |
| ·包涵体的提取及目的蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·包涵体的提取 | 第37页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·复性的IL-2 蛋白生物活性检测 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| ·犬IFN-γ和IL-2 基因的扩增和序列分析 | 第39页 |
| ·目的基因在原核细胞中的理想表达 | 第39-40页 |
| ·表达产物的处理及生物活性的检测 | 第40-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录1 实验技术路线 | 第50-51页 |
| 附录2 犬IFN-γ和IL-2 基因克隆及表达载体构建图 | 第51-52页 |
| 附录3 各种动物IL-2 及IFN-γ基因的同源性比较 | 第52-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
