| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-15页 |
| ·葡萄卷叶相关病毒研究进展 | 第9-13页 |
| ·发现史 | 第9页 |
| ·症状 | 第9页 |
| ·传播 | 第9-10页 |
| ·分类 | 第10-11页 |
| ·检测技术 | 第11-12页 |
| ·防治措施 | 第12-13页 |
| ·葡萄卷叶相关病毒2研究进展 | 第13-15页 |
| 2 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 3 GLRaV-2的血清学检测 | 第16-19页 |
| ·试验材料与试剂 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·反应溶液 | 第16-17页 |
| ·试验方法 | 第17页 |
| ·试验结果 | 第17-18页 |
| ·讨论 | 第18-19页 |
| 4 GLRaV-2外壳蛋白基因的克隆与序列分析 | 第19-30页 |
| ·试验材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·质粒与菌株 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·dsRNA提取溶液的配制 | 第19页 |
| ·抗生素及培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·PAGE相关试剂的配制 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-25页 |
| ·dsRNA的提取 | 第20-21页 |
| ·GLRaV-2外壳蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第21-23页 |
| ·RT-PCR引物的设计及合成 | 第21页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第21页 |
| ·PCR扩增 | 第21-23页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第23页 |
| ·克隆载体的构建 | 第23页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·连接产物与转化 | 第24页 |
| ·重组质粒DNA的鉴定 | 第24-25页 |
| ·质粒DNA小样制备与纯化 | 第24页 |
| ·重组质粒DNA的PCR鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第25页 |
| ·试验结果 | 第25-29页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第25页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第25页 |
| ·序列分析结果 | 第25-28页 |
| ·系统进化树分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 5 GLRaV-2-sh外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第30-39页 |
| ·试验材料与试剂 | 第30页 |
| ·质粒与菌株 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·所需溶液 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态的制备 | 第30-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·转化表达菌株BL21(DE3) | 第32页 |
| ·诱导表达外壳蛋白 | 第32-33页 |
| ·菌体裂解物SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33-34页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第33页 |
| ·上样电泳 | 第33页 |
| ·染色脱色 | 第33-34页 |
| ·表达产物抗原性分析 | 第34页 |
| ·试验结果 | 第34-37页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第34页 |
| ·葡萄糖对原核表达的影响 | 第34-35页 |
| ·表达产物抗原性分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 致谢 | 第45页 |