| 引言 | 第1-26页 |
| 1.C pG-ODNs 抗肿瘤研究综述 | 第8-21页 |
| ·CpG-ODN 的分子结构特征,作用机制及分类 | 第8-11页 |
| ·CpG-ODN 的分子结构特征 | 第8-9页 |
| ·CpG-ODN 的分类及各类的主要免疫学活性 | 第9页 |
| ·CpG-ODN 的作用机制 | 第9-11页 |
| ·CpG-ODN 在抗肿瘤方面的机制及应用 | 第11-21页 |
| ·CpG-ODN 作为单独的抗肿瘤制剂 | 第11-16页 |
| ·CpG-ODN 作为各种肿瘤疫苗的佐剂 | 第16-20页 |
| ·CpG-ODN 与生物制剂或化疗药联合应用的抗肿瘤作用 | 第20-21页 |
| 2.H SP65-MUC1 和HSP-HER2 抗原肽疫苗简介 | 第21-26页 |
| 材料与方法 | 第26-37页 |
| 1. 主要材料与试剂 | 第26-28页 |
| ·主要材料 | 第26页 |
| ·CpG-ODNs | 第26页 |
| ·质粒与菌种 | 第26页 |
| ·转染细胞模型 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-28页 |
| ·弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 | 第26-27页 |
| ·ELISA 抗体 | 第27页 |
| ·间接ELISA 和夹心ELISA 试剂 | 第27页 |
| ·细胞裂解缓冲夜 | 第27-28页 |
| ·Western Blotting 发光试剂盒 | 第28页 |
| 2. 主要方法 | 第28-37页 |
| ·转染细胞鉴定 | 第28-30页 |
| ·荧光显微镜检测 | 第28页 |
| ·流式细胞测定技术 | 第28页 |
| ·细胞Western Blotting | 第28-30页 |
| ·小鼠体内实验 | 第30-31页 |
| ·治疗性模型-先瘤后药 | 第30-31页 |
| ·预防性模型-先药后瘤 | 第31页 |
| ·先瘤后药和先药后瘤小鼠抗体测定(间接法) | 第31页 |
| ·HSP-HER2 抗原检测方法的条件确定(夹心法) | 第31-33页 |
| ·检测多克隆抗体(豚鼠抗 3HER2-histag)的获得 | 第31-33页 |
| ·包被多克隆抗体和检测多克隆抗体最佳稀释度的确定 | 第33页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第33页 |
| ·HSP-HER2 抗体检测方法的条件确定(间接法) | 第33-36页 |
| ·HSP-HER2 蛋白诱导表达及纯化 | 第33-35页 |
| ·阳性血清制备 | 第35页 |
| ·最佳蛋白包板量和最佳血清稀释度的确定 | 第35-36页 |
| ·待测样品检定 | 第36页 |
| ·统计学检验 | 第36-37页 |
| 实验结果 | 第37-49页 |
| 1.C pG-ODNs 与HSP-MUC1 联用的抗肿瘤作用 | 第37-46页 |
| ·MUC1-EL4 转染细胞的鉴定 | 第37-38页 |
| ·荧光镜检 | 第37页 |
| ·流式细胞测定 | 第37页 |
| ·细胞Western Blotting | 第37-38页 |
| ·HSP-MUC11/CpG-ODNs 对 MUC1-EL4 肿瘤细胞生长的抑制作用(治疗性模型) | 第38-41页 |
| ·肿瘤生长曲线和肿瘤重量分布 | 第38-39页 |
| ·荷瘤小鼠对HSP-MUC1 的体液免疫应答 | 第39-41页 |
| ·HSP-MUC1/CpG-ODNs 对 MUC1-EL4 肿瘤细胞生长的抑制作用(预防性模型) | 第41-46页 |
| ·生存曲线 | 第41-42页 |
| ·肿瘤发生曲线 | 第42-43页 |
| ·肿瘤生长曲线和肿瘤体积中位数的时间曲线 | 第43-44页 |
| ·荷瘤小鼠对HSP-MUC1 的体液免疫应答 | 第44-46页 |
| 2.H SP-HER2 及其抗体检测方法的建立 | 第46-49页 |
| ·HSP-HER2 检测方法的建立 | 第46-47页 |
| ·豚鼠抗3HER2-histag 多克隆IgG 效价确定 | 第46页 |
| ·包被抗体和检测抗体最佳稀释度的确定 | 第46-47页 |
| ·夹心法检测HSP-HER2 的ELISA 标准曲线 | 第47页 |
| ·HSP-HER2 抗体检测条件的确定及应用 | 第47-49页 |
| ·间接法检测HSP-HER2 抗体条件的确定 | 第47-48页 |
| ·正常 C57BL/6 小鼠对 HSP-HER2 的体液免疫应答 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-53页 |
| 1. CpG-ODNs 在HSP-MUC1/CpG-ODNs 中发挥抗肿瘤作用的机制 | 第49-50页 |
| 2. CpG-ODN 与 HSP-MUC1 联用的抗肿瘤作用在治疗性和预防性模型中的差异 | 第50-51页 |
| ·总体效果的差异 | 第50页 |
| ·各类 CpG-ODN 作用的差异 | 第50-51页 |
| 3. 关于荷瘤小鼠针对 HSP-MUC1 肿瘤疫苗的抗体 | 第51-52页 |
| 4. 关于双抗夹心 ELISA 方法检测 HSP-HER2 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-62页 |
| 附图和附表 | 第62-78页 |
| 中文摘要 | 第78-82页 |
| Abstract | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 导师简介 | 第88-89页 |
| 作者简历 | 第89页 |
