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用GFP标签定量测定蛋白质-DNA相互作用解离平衡常数的探讨

提要第1-8页
第一章 前言第8-19页
   ·蛋白质-DNA 相互作用第8-13页
     ·蛋白质-DNA 相互作用的研究方法第8-9页
     ·蛋白质-DNA 相互作用的定性研究方法及原理第9-10页
     ·蛋白质-DNA 相互作用的定量研究方法及原理第10-12页
     ·蛋白质-DNA 相互作用研究的展望第12-13页
   ·绿色荧光蛋白第13-17页
     ·GFP 的三级结构及其发光基团第14-15页
     ·GFP 荧光稳定性第15-17页
   ·融合蛋白标签第17-19页
第二章 实验材料与方法第19-38页
   ·实验仪器第19-20页
   ·实验试剂及溶液的配制第20-26页
   ·菌株和质粒第26页
   ·PCR 引物合成及末端生物素修饰第26-27页
   ·计算机辅助工具第27页
   ·重组质粒的构建第27-31页
   ·重组质粒的筛选第31页
   ·筛选的重组质粒的测序第31-32页
   ·重组质粒的表达及蛋白纯化第32-33页
   ·GFP 为标签蛋白质DNA 相互作用的解离常数测定-第33-38页
第三章 结果第38-55页
   ·重组质粒的构建第38-40页
   ·重组质粒的筛选第40-43页
   ·重组质粒的测序第43-44页
   ·重组质粒的表达和纯化第44-45页
   ·EREBP_2-GFP 蛋白荧光稳定性的测定第45-48页
   ·荧光强度与蛋白浓度的关系的测定第48-51页
   ·5’-biotin-dsDNA 固定效率的检测第51-52页
   ·GFP 为标签蛋白质-DNA 相互作用的解离常数测定第52-55页
第四章 讨论第55-60页
   ·蛋白质的分离纯化第55页
   ·EREBP2-GFP 蛋白荧光强度稳定性第55-56页
   ·5’-biotin-dsDNA 固定效率第56-57页
   ·GFP 为标签蛋白质-DNA 相互作用的解离常数测定第57-58页
   ·GFP 为标签与 P 标记EMSA 法的比较第58-59页
   ·GFP 为标签与酶为标签的比较第59-60页
第五章 结论第60-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
摘要第67-68页
英文摘要第68-70页
导师及作者简介第70-71页
附录第71-74页

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