中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-14页 |
前言 | 第14-19页 |
材料和方法 | 第19-38页 |
一、实验动物和细胞 | 第19页 |
二、仪器与试剂 | 第19-24页 |
三、实验方法 | 第24-38页 |
(一) 小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养 | 第24-26页 |
(二) 小鼠D3-ES细胞维持培养 | 第26页 |
(三) MTT比色检测法黄芩苷对ES细胞增殖的影响 | 第26-27页 |
(四) ES细胞体外分化为心肌细胞的培养步骤 | 第27-28页 |
(五) 黄芩苷诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞的培养 | 第28页 |
(六) 分化EB的形态学观察及大小测量 | 第28-29页 |
(七) 细胞免疫荧光染色鉴定分化出的心肌样细胞 | 第29-30页 |
(八) 流式细胞术检测黄芩苷对ES细胞分化为心肌细胞数量的影响 | 第30-31页 |
(九) RT-PCR法检测相关基因的mRNA水平 | 第31-34页 |
(十) Western blot检测分化过程中心肌特异性蛋白的表达 | 第34-36页 |
(十一) 膜片钳记录干细胞来源的心肌细胞的电生理学特点 | 第36-37页 |
(十二) 统计学方法 | 第37-38页 |
实验结果 | 第38-51页 |
(一) 不同浓度黄芩苷对ES细胞增殖的影响 | 第38页 |
(二) ES细胞及不同分化阶段的细胞形态观察 | 第38-40页 |
(三) 黄芩苷对分化过程中EBs直径的影响 | 第40-41页 |
(四) 不同浓度黄芩苷对ES细胞向心肌细胞分化的影响 | 第41-43页 |
(五) 黄芩苷对三个胚层标志物表达的影响 | 第43-44页 |
(七) 黄芩苷能增加心肌相关特异性基因的表达 | 第44-45页 |
(八) 黄芩苷诱导ES细胞分化出的心肌细胞鉴定 | 第45-49页 |
(九) 黄芩苷对ES细胞分化为心肌细胞过程中调控基因表达的影响 | 第49-51页 |
讨论 | 第51-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
缩略词 | 第62-64页 |
综述 | 第64-86页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录 | 第86-89页 |
致谢 | 第89页 |