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应用双特异分子探针技术对圆海链藻(Thalassiosira rotula)进行定性定量检测研究

第一节 文献综述第1-31页
   ·海洋硅藻及其生态学意义第13-14页
     ·海洋硅藻第13页
     ·圆海链藻(Thalassiosira rotula)第13-14页
   ·海洋浮游植物的检测方法第14-19页
     ·形态学观察第14页
     ·核酸探针技术第14-15页
     ·免疫学技术第15-16页
     ·实时荧光定量PCR第16页
     ·PCR-ELISA第16-17页
     ·流式细胞术第17页
     ·HPLC技术第17-18页
     ·生物传感器第18页
     ·生物芯片第18-19页
   ·核酸探针技术及其在浮游植物检测中的应用第19-25页
     ·核酸探针技术第19-23页
     ·核酸探针技术在浮游植物检测中的应用第23-25页
   ·双特异分子探针技术及其在浮游植物检测中的应用第25-28页
   ·基于核酸杂交技术的浮游植物检测仪器第28-31页
第二节 材料与方法第31-43页
   ·材料第31-33页
     ·试剂第31-32页
     ·主要仪器第32-33页
     ·实验材料及其来源第33页
   ·实验方法第33-43页
     ·藻种培养与收获第33-34页
     ·海藻总DNA及总RNA提取第34页
     ·引物设计及rDNA序列扩增第34-35页
     ·克隆与测序第35-37页
     ·序列分析及探针设计第37页
     ·双特异分子探针技术检测方法的建立第37-40页
     ·靶物质验证实验第40页
     ·特异性检测实验第40页
     ·模拟样品的检测第40-41页
     ·样品保存方式对检测信号的影响第41页
     ·整个生长周期内检测信号的变化第41-43页
第三节 实验结果与分析第43-55页
   ·18S rRNA基因序列扩增及阳性克隆验证结果第43-44页
   ·18S rRNA基因测序结果第44-45页
   ·序列比对与探针设计结果第45-46页
   ·检测方法的建立第46-49页
     ·抓捕探针最优浓度第46页
     ·连接探针最优浓度第46-47页
     ·探针标记方法的选择第47-48页
     ·酶切温度对信号值及信号特异性的影响第48页
     ·样品预处理方式的选择第48-49页
   ·靶物质验证结果第49-50页
   ·探针特异性实验第50页
   ·建立标准曲线与模拟样品检测结果第50-52页
     ·建立标准曲线第50-51页
     ·模拟样品检测第51-52页
   ·保存方式对检测信号的影响第52页
   ·整个生长周期中检测信号的变化第52-55页
第四节 讨论第55-63页
   ·双特异分子探针技术的优势第55页
   ·双特异分子探针技术检测方法建立及验证过程中应考虑的问题第55-59页
     ·靶序列的选择第55页
     ·双特异分子探针的设计第55-57页
     ·探针标记方法及信号检测方式的选择第57-58页
     ·探针最优使用浓度的选择第58页
     ·杂交条件的优化第58页
     ·酶切条件的优化第58页
     ·样品预处理方法对检测结果的影响第58-59页
     ·靶物质的验证第59页
   ·双特异分子探针技术应用于自然海区样品的检测第59-63页
     ·定性检测第59页
     ·标准曲线的建立及自然样品的检测第59-60页
     ·样品保存方式对检测信号的影响第60页
     ·细胞生长状态对检测信号的影响第60-63页
结论第63-65页
参考文献第65-77页
致谢第77-78页
发表论文情况第78页

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