第一节 文献综述 | 第1-31页 |
·海洋硅藻及其生态学意义 | 第13-14页 |
·海洋硅藻 | 第13页 |
·圆海链藻(Thalassiosira rotula) | 第13-14页 |
·海洋浮游植物的检测方法 | 第14-19页 |
·形态学观察 | 第14页 |
·核酸探针技术 | 第14-15页 |
·免疫学技术 | 第15-16页 |
·实时荧光定量PCR | 第16页 |
·PCR-ELISA | 第16-17页 |
·流式细胞术 | 第17页 |
·HPLC技术 | 第17-18页 |
·生物传感器 | 第18页 |
·生物芯片 | 第18-19页 |
·核酸探针技术及其在浮游植物检测中的应用 | 第19-25页 |
·核酸探针技术 | 第19-23页 |
·核酸探针技术在浮游植物检测中的应用 | 第23-25页 |
·双特异分子探针技术及其在浮游植物检测中的应用 | 第25-28页 |
·基于核酸杂交技术的浮游植物检测仪器 | 第28-31页 |
第二节 材料与方法 | 第31-43页 |
·材料 | 第31-33页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·实验材料及其来源 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-43页 |
·藻种培养与收获 | 第33-34页 |
·海藻总DNA及总RNA提取 | 第34页 |
·引物设计及rDNA序列扩增 | 第34-35页 |
·克隆与测序 | 第35-37页 |
·序列分析及探针设计 | 第37页 |
·双特异分子探针技术检测方法的建立 | 第37-40页 |
·靶物质验证实验 | 第40页 |
·特异性检测实验 | 第40页 |
·模拟样品的检测 | 第40-41页 |
·样品保存方式对检测信号的影响 | 第41页 |
·整个生长周期内检测信号的变化 | 第41-43页 |
第三节 实验结果与分析 | 第43-55页 |
·18S rRNA基因序列扩增及阳性克隆验证结果 | 第43-44页 |
·18S rRNA基因测序结果 | 第44-45页 |
·序列比对与探针设计结果 | 第45-46页 |
·检测方法的建立 | 第46-49页 |
·抓捕探针最优浓度 | 第46页 |
·连接探针最优浓度 | 第46-47页 |
·探针标记方法的选择 | 第47-48页 |
·酶切温度对信号值及信号特异性的影响 | 第48页 |
·样品预处理方式的选择 | 第48-49页 |
·靶物质验证结果 | 第49-50页 |
·探针特异性实验 | 第50页 |
·建立标准曲线与模拟样品检测结果 | 第50-52页 |
·建立标准曲线 | 第50-51页 |
·模拟样品检测 | 第51-52页 |
·保存方式对检测信号的影响 | 第52页 |
·整个生长周期中检测信号的变化 | 第52-55页 |
第四节 讨论 | 第55-63页 |
·双特异分子探针技术的优势 | 第55页 |
·双特异分子探针技术检测方法建立及验证过程中应考虑的问题 | 第55-59页 |
·靶序列的选择 | 第55页 |
·双特异分子探针的设计 | 第55-57页 |
·探针标记方法及信号检测方式的选择 | 第57-58页 |
·探针最优使用浓度的选择 | 第58页 |
·杂交条件的优化 | 第58页 |
·酶切条件的优化 | 第58页 |
·样品预处理方法对检测结果的影响 | 第58-59页 |
·靶物质的验证 | 第59页 |
·双特异分子探针技术应用于自然海区样品的检测 | 第59-63页 |
·定性检测 | 第59页 |
·标准曲线的建立及自然样品的检测 | 第59-60页 |
·样品保存方式对检测信号的影响 | 第60页 |
·细胞生长状态对检测信号的影响 | 第60-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
发表论文情况 | 第78页 |