缩略语表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
前言 | 第12-13页 |
文献回顾 | 第13-27页 |
正文 | 第27-68页 |
1 实验材料和主要仪器 | 第27-28页 |
·质粒和菌种 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-43页 |
·质粒构建 | 第28-38页 |
·cDNA文库 | 第38页 |
·酵母转化 | 第38-40页 |
·酵母质粒的提取 | 第40页 |
·氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第40页 |
·重组质粒转化 | 第40页 |
·重组质粒的鉴定 | 第40页 |
·蛋白表达 | 第40-41页 |
·蛋白纯化 | 第41页 |
·Western-blot检测 | 第41-42页 |
·细胞转染 | 第42页 |
·MINT-F6与MINT相互作用的区域 | 第42页 |
·GST pull-down assay | 第42页 |
·免疫共沉淀 | 第42-43页 |
·哺乳动物细胞双杂交 | 第43页 |
·RePorter assay | 第43页 |
3实验结果 | 第43-60页 |
·MINT-F6与MINT的相互作用 | 第44-46页 |
·GST-pull down assay 验证MINT蛋白在C端发生自身相互作用 | 第46-50页 |
·细胞内核基质蛋白MINT可以发生相互作用 | 第50-54页 |
·截短体试验分析相互作用位点 | 第54-59页 |
·MINT蛋白自身相互作用对于Notch/RBP-J 转录调控的影响 | 第59-60页 |
4讨论 | 第60-67页 |
·蛋白质之间的相互作用多种研究方法的互补性 | 第61-63页 |
·酵母双杂交方法筛选到MINT可以发生自身相互作用 | 第63页 |
·体内体外条件下MINT蛋白质可以发生自身相互作用 | 第63-64页 |
·MINT-F6片断截短体GST pull-down试验结果显示在体外条件下MINI蛋白质自身相互作用发生在SPOC结构域。 | 第64-65页 |
·MINT蛋白质自身相互作用对Notch/RBP-信号途径转录调控的影响 | 第65-66页 |
·MINT-F6一NLS显性负突变效应 | 第66-67页 |
5.结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
个人简历 | 第75页 |
研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |