| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-39页 |
| 1 西瓜抗病育种研究进展 | 第15-19页 |
| ·西瓜枯萎病简介 | 第15页 |
| ·枯萎病的防治及抗病育种研究进展 | 第15-17页 |
| ·嫁接防病技术研究 | 第15-16页 |
| ·化学防治和生物防治技术的研究 | 第16页 |
| ·农业防治措施 | 第16页 |
| ·抗病品种的引进、筛选和利用 | 第16-17页 |
| ·西瓜抗病育种中面临的问题 | 第17-19页 |
| ·遗传基础狭窄 | 第17-18页 |
| ·抗病种质资源缺乏 | 第18页 |
| ·抗病性遗传复杂、病原微生物多态性强、变异广泛 | 第18-19页 |
| 2 植物抗真菌基因工程研究进展 | 第19-35页 |
| ·抗真菌基因工程中常用的目的基因 | 第19-29页 |
| ·植物几丁质酶基因研究进展 | 第19-26页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶研究进展 | 第26-28页 |
| ·植物抗真菌基因工程中常用的其它基因 | 第28-29页 |
| ·抗真菌基因工程中常用的转化方法 | 第29-32页 |
| ·农杆菌介导法 | 第29-30页 |
| ·基因枪转化技术 | 第30-31页 |
| ·聚乙二醇等介导的以原生质体培养为基础的转化途径 | 第31页 |
| ·直接导入法 | 第31-32页 |
| ·抗真菌基因工程中存在的问题、解决途径及展望 | 第32-35页 |
| ·复杂的基因沉默现象 | 第32页 |
| ·表达水平、基因来源和抗病性的关系 | 第32-33页 |
| ·外源基因导入后的定位 | 第33-34页 |
| ·多基因联合导入 | 第34-35页 |
| 3 西瓜基因工程研究进展 | 第35-37页 |
| ·西瓜组织培养研究进展 | 第35-37页 |
| ·激素种类和浓度的影响 | 第35-36页 |
| ·基因型和苗龄的影响 | 第36页 |
| ·外植体类型的影响 | 第36页 |
| ·培养条件的影响 | 第36页 |
| ·西瓜组织培养过程中存在的问题 | 第36-37页 |
| ·西瓜转基因进展 | 第37页 |
| 4 本研究的内容及意义 | 第37-39页 |
| 几丁质酶基因和几丁质酶-葡聚糖酶双价基因导入西瓜的研究 | 第39-85页 |
| 第一章 西瓜组织培养体系的建立 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·培养基与激素 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| ·外植体部位对不定芽诱导率的影响 | 第40-41页 |
| ·苗龄对不定芽诱导率的影响 | 第41页 |
| ·激素浓度配比对不定芽诱导率的影响 | 第41-42页 |
| ·基因型对不定芽诱导率的影响 | 第42-43页 |
| ·激素浓度配比对不定芽伸长的影响 | 第43页 |
| ·激素浓度配比对试管苗生根的影响 | 第43页 |
| ·试管苗的移栽 | 第43-44页 |
| ·愈伤组织的诱导及分化 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-49页 |
| 第二章 农杆菌介导西瓜遗传转化体系的优化 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·受体材料、供试菌株和质粒 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·外植体的获得 | 第50页 |
| ·抗生素敏感性测验 | 第50页 |
| ·工程菌液的制备 | 第50页 |
| ·叶盘法转化 | 第50-51页 |
| ·GUS检测 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-54页 |
| ·抗生素敏感性 | 第51-52页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第52页 |
| ·农杆菌菌株类型和共培养时间对转化的影响 | 第52-53页 |
| ·菌液浓度对转化效率的影响 | 第53页 |
| ·侵染时间对转化效率的影响 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第三章 植物表达载体的构建 | 第55-69页 |
| 1 材料与方法 | 第55-66页 |
| ·质粒 | 第55页 |
| ·工具酶、生化试剂和试剂盒 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-66页 |
| ·质粒提取 | 第55-57页 |
| ·质粒的限制性酶切反应 | 第57页 |
| ·凝胶中DNA片段的回收 | 第57页 |
| ·连接反应 | 第57-58页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第58-59页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第59页 |
| ·重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第59-60页 |
| ·含Chi3的植物表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·含Chi3和Glu-Ac的双基因植物表达载体的构建 | 第61-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第四章 转基因西瓜植株的获得及其检测 | 第69-84页 |
| 1 叶盘法转化西瓜及转基因植株的再生 | 第69-72页 |
| ·受体材料、培养基和菌株 | 第69页 |
| ·无菌苗的培养和转化用外植体的准备 | 第69-70页 |
| ·侵染用工程菌液的准备 | 第70页 |
| ·农杆菌的侵染 | 第70页 |
| ·转基因植株的获得 | 第70-72页 |
| 2 转基因植株的检测 | 第72-75页 |
| ·试剂盒与药品 | 第72页 |
| ·转基因植株总DNA和RNA样品的制备 | 第72-73页 |
| ·植物基因组DNA微量提取法 | 第72页 |
| ·植物总RNA微量提取法 | 第72-73页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第73-75页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第73页 |
| ·转基因植株的Southern杂交检测 | 第73-74页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第74-75页 |
| ·转基因植株的抗病性离体检测 | 第75页 |
| ·供试病原菌 | 第75页 |
| ·马铃薯培养基的制备 | 第75页 |
| ·侵染用病原菌液的准备 | 第75页 |
| ·转基因植株叶片细胞粗提液抑菌效果检测 | 第75页 |
| ·转基因植株离体叶片抗病性鉴定 | 第75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-81页 |
| ·DNA的微量提取 | 第75-76页 |
| ·RNA的微量提取 | 第76页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第76-78页 |
| ·导入Chi3植株的PCR检测 | 第77页 |
| ·转双基因植株的PCR检测 | 第77-78页 |
| ·转基因植株的Southern印迹杂交 | 第78页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第78-79页 |
| ·转基因植株的的抗病性离体检测 | 第79-81页 |
| ·转基因植株叶片细胞粗提液抑菌效果检测 | 第79-80页 |
| ·转基因植株离体叶片抗病性鉴定 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-84页 |
| 小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 附录Ⅰ | 第97-98页 |
| 附录Ⅱ | 第98-99页 |
| 附录Ⅲ | 第99-100页 |