H5N1亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备与鉴定
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前 言 | 第10-21页 |
| ·AIV生物学特性及AI | 第10-12页 |
| ·高致病性禽流感的分子生物学特性 | 第12-14页 |
| ·高致病性禽流感发生 | 第14-16页 |
| ·高致病性禽流感的公共卫生意义 | 第16-18页 |
| ·高致病性禽流感的诊断与防制 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-29页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·动物与细胞 | 第22页 |
| ·病毒 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-29页 |
| ·全病毒纯化抗原的制备 | 第22页 |
| ·动物免疫 | 第22页 |
| ·血凝抑制检测方法的建立 | 第22-23页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第23-24页 |
| ·细胞融合 | 第24-25页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养及单克隆抗体的筛选检测 | 第25页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化及冻存和复苏 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第26页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第26-28页 |
| ·HA单克隆抗体免疫荧光法检测病毒感染组织实验 | 第28-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-41页 |
| ·抗原的制备 | 第29页 |
| ·ELISA筛选方法的建立 | 第29-31页 |
| ·NP蛋白包被ELISA方法最佳工作条件的建立 | 第29-30页 |
| ·全病毒包被ELISA方法最佳工作条件的建立 | 第30-31页 |
| ·动物免疫与抗体水平检测 | 第31页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第31-32页 |
| ·细胞融合率与阳性率的计算 | 第31页 |
| ·单克隆抗体的筛选与单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第32-36页 |
| ·HA特异性单克隆抗体效价 | 第32页 |
| ·NP特异性单克隆抗体效价 | 第32页 |
| ·病毒其他蛋白特异性单克隆抗体效价 | 第32-33页 |
| ·染色体分析结果 | 第33-34页 |
| ·HA特异性单克隆抗体稳定性分析 | 第34-35页 |
| ·抗体亚类分析 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞株抗体分泌稳定性的测定 | 第36页 |
| ·HA亚型特异性实验 | 第36-37页 |
| ·对禽流感不同亚型病毒特异性实验 | 第36-37页 |
| ·对不同H5亚型分离株的交叉特异性实验 | 第37页 |
| ·对其他具有HA活性病毒反应性 | 第37页 |
| ·HA单克隆抗体对H5亚型病毒中和特性 | 第37-39页 |
| ·免疫荧光实验 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·抗原的制备与动物免疫 | 第41页 |
| ·在细胞的融合及单克隆细胞株筛选 | 第41页 |
| ·筛选方法的建立 | 第41-42页 |
| ·HA亚型特异性反应实验 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |