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病毒性肝炎基因芯片诊断技术研究和临床应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第1章 文献综述第11-25页
 1.基因芯片的概念及发展概况第11-13页
   ·基因芯片的概念第11-12页
   ·基因芯片的发展概况第12-13页
 2.基因芯片的分类第13-14页
   ·根据支持介质划分第13页
   ·根据芯片上的探针划分第13-14页
 3.基因芯片的制备第14-18页
   ·对基因芯片载体的要求第14页
   ·基因芯片载体的材料选择第14-15页
   ·载体的活化第15页
   ·基因芯片的基本制作方法第15-17页
   ·制作基因芯片的常用工具第17-18页
 4.基因芯片的应用第18-22页
     ·病毒性肝炎基因诊断芯片的开发应用第18-19页
     ·基因芯片在肿瘤相关基因的应用研究第19-20页
   ·基因芯片在DNA序列测定中的研究第20页
   ·DNA芯片在基因表达分析中的研究第20页
   ·基因芯片对细菌基因分型及菌种鉴定第20-21页
   ·药物筛选第21页
   ·给药个性化第21-22页
 5.基因芯片发展前景及存在的问题第22-23页
 6.本研究的目的及意义第23-25页
第2章 病毒性肝炎基因诊断芯片的设计第25-50页
 1.基因芯片研制的基本原理和总体技术路线第25-27页
   ·基因芯片制备的相关技术第25-26页
   ·基因芯片的相关技术流程图第26页
   ·基因芯片的应用流程图第26-27页
 2.病毒性肝炎基因诊断芯片的设计路线第27-28页
   ·肝炎病毒检测芯片设计及研制全过程的流程图第27-28页
 3.病毒性肝炎基因诊断芯片探针设计第28-50页
   ·查找序列方法和结果第28-31页
   ·探针设计第31-50页
       ·探针设计原理第31-33页
     ·探针设计中运用工具第33-36页
       ·设计原则第36-37页
       ·方法和步骤第37-40页
       ·布局和对照第40-41页
       ·探针设计结果第41-50页
第3章 病毒性肝炎基因诊断芯片引物设计第50-62页
 1.设计工具第50-51页
 2.设计结果及部分引物列表第51-53页
 3.引物的测试筛选及PCR扩增第53-62页
   ·PCR扩增效率指标第53页
   ·样品纯化方法第53-54页
   ·最适合PCR反应循环条件与最适反应体系配比的建立第54页
   ·引物的筛选第54-57页
     ·引物的确定第54-55页
     ·同一引物用于扩增不同病人标本以判断引物的稳定性第55-56页
     ·不对称PCR反应结果第56-57页
   ·各肝炎病毒的代表序列的有关资料第57-62页
第4章 病毒性肝炎基因诊断芯片的制作第62-73页
 1.乙丙型肝炎双检基因芯片的制作第62-64页
   ·HBV、HCV克隆的构建第62页
   ·监控系统组成第62页
   ·芯片点样第62-63页
     ·结果判定第63-64页
 2 乙型肝炎基因分型诊断芯片的制作第64-68页
   ·玻片的清洗第64页
   ·手臂分子的固定第64-66页
   ·点样第66-67页
   ·芯片结构示意图第67页
   ·芯片杂交检测意义第67-68页
 3 丙型肝炎基因分型诊断芯片制作第68-73页
   ·基因芯片载体制备第68页
   ·基因芯片探针制备第68页
   ·HCV基因芯片探针序列及分型诊断第68-70页
   ·HCV基因分型诊断基因芯片模板示意图第70-71页
   ·HCV基因芯片合成点样第71-73页
第5章 病毒性肝炎基因诊断芯片的临床应用研究第73-100页
 1.研究对像和诊断标准第73页
 2.配对资料第73-74页
 3.临床研究误差控制措施第74页
 4.基因芯片检测血清中HBVDNA、HCVRNA操作程序及方法第74-75页
   ·待测血清样品处理第74页
   ·反转录及PCR扩增第74页
   ·杂交第74-75页
   ·检测分析第75页
 5.基因芯片检测肝组织中HBVDNA操作程序及方法第75-76页
 6.肝组织中HBV免疫组织化学、原位分子杂交法检测的操作程序及方法第76-77页
   ·免疫组化标准化的染色方法第76页
   ·肝组织HBcAg检测第76页
   ·原位分子杂交方法第76-77页
   ·肝组织HBVDNA检测第77页
   ·例乙型肝炎血清、20例丙型肝炎血清基因芯片检测结果第77-81页
   ·例乙型肝炎肝硬化肝组织中HBVDNA基因芯片检测结果第81页
   ·例乙型肝炎患者血清及肝活检组织中HBVDNA基因芯片同时检测结果第81-84页
   ·例拉米夫定治疗乙型肝炎血清HBVDNA基因芯片检测结果第84-87页
   ·标本来源第84页
   ·HBVDNA基因扩增序列及扩增片段及探针序列第84-85页
   ·结果第85-87页
   ·例乙型肝炎病人血清基因芯片分型检测结果第87-89页
   ·例丙型肝炎血清HCVRNA分型基因芯片检测结果第89-92页
   ·血清标本第89页
   ·HCVRNA的分离和纯化第89页
   ·逆转录反应步骤第89页
   ·巢式PCR反应第89-90页
   ·杂交第90页
   ·检测分析第90页
   ·对5′UTR区扩增产物进行测序第90-91页
   ·结果第91-92页
 13.临床实验的部分图片及报告第92-100页
   ·乙、丙型肝炎基因双检芯片照片第92-93页
   ·丙型肝炎基因分型芯片照片第93-96页
   ·免疫组织化学检测结果照片第96-97页
   ·原位分子杂交检测结果照片第97-98页
   ·测序报告单第98-99页
   ·Lightcycle HBVDNA、HCVRNA报告单第99-100页
第6章 全文讨论第100-106页
第7章 全文总结第106-108页
参考文献第108-122页
在读期间发表的学术论文目录第122-125页
在读期间承担的科研和获得科研经费资助第125-126页
在读期间获得科研奖励第126-127页
在读期间获得表彰和荣誉称号第127-128页
在读期间申请和获得的专利第128-129页
致谢第129页

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