| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-14页 |
| 一、 同源异型框基因(HOMEOBOX GENES)简介 | 第8页 |
| 二、 PEM同源异型框基因简介 | 第8-12页 |
| 1 Pem的发现及命名 | 第8页 |
| 2 Pem基因是一个同源异型框基因 | 第8-9页 |
| 3 Pem基因的结构及调控 | 第9-10页 |
| 4 Pem基因的表达及其产物的功能 | 第10-12页 |
| 三、 课题背景、思路和技术路线 | 第12-14页 |
| 实验部分 | 第14-33页 |
| 主要仪器 | 第14页 |
| 实验材料 | 第14-16页 |
| 1 菌株、质粒、引物 | 第14-15页 |
| 2 工具酶和主要试剂 | 第15页 |
| 3 溶液和培养基 | 第15-16页 |
| 实验方法 | 第16-25页 |
| 1 PCR扩增Pem基因cDNA编码序列 | 第16-18页 |
| 2 回收产物的双酶切、纯化、浓缩 | 第18-19页 |
| 3 质粒pGEX-4T-3的提取、双酶切、去磷酸化 | 第19-20页 |
| 4 外源基因和载体的连接 | 第20页 |
| 5 E.coli感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| 6 转化 | 第21页 |
| 7 重组子的鉴定 | 第21-23页 |
| 8 GST／mPem融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达与检测 | 第23页 |
| 9 GST／mPem融合蛋白的纯化 | 第23-25页 |
| 10 GST／mPem融合蛋白的羟胺切割试验 | 第25页 |
| 实验结果 | 第25-31页 |
| 1 表达载体pGEX-4T／mPem的构建 | 第25-26页 |
| 2 重组子的鉴定 | 第26-27页 |
| 3 重组子的诱导表达动态分析 | 第27-28页 |
| 4 重组蛋白的亲和层析纯化 | 第28-29页 |
| 5 羟胺切割分析 | 第29-31页 |
| 讨论 | 第31-33页 |
| 1 表达载体的选择 | 第31-32页 |
| 2 关于GST／mPem在大肠杆菌中的表达 | 第32页 |
| 3 关于GST／mPem纯化 | 第32-33页 |
| 结论与展望 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 附录 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
