| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写表 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-25页 |
| 一、 植物发育过程中的质外体多肽信使 | 第10页 |
| 二、 植物质外体CaM研究进展 | 第10-16页 |
| 三、 质外体CaMBPs研究进展 | 第16-18页 |
| 四、 CaM的时空特异性与研究植物质外体CaM功能的新思路 | 第18-21页 |
| 五、 根癌农杆菌介导的遗传转化技术原理与研究进展 | 第21-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 材料和方法 | 第26-37页 |
| 一、 实验材料及试剂 | 第26页 |
| 二、 实验方法 | 第26-37页 |
| 1 点印迹(dot blotting) | 第26-28页 |
| 2 PCR连接外源基因小片段 | 第28页 |
| 3 质粒DNA小量提取的碱裂解法 | 第28-29页 |
| 4 E.coli CaCl_2感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 5 E.coli的热激转化方法及蓝白斑法鉴定 | 第30页 |
| 6 Agrobacterium tumefaciens(GV3101)电击感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 7 Agrobacteriuw tumefaciens的电击转化方法 | 第31页 |
| 8 二元载体的测序 | 第31-33页 |
| 9 拟南芥的种植方法 | 第33-34页 |
| 10 拟南芥的真空渗透法转化 | 第34页 |
| 11 转基因种子的筛选 | 第34-35页 |
| 12 拟南芥基因组DNA的简易粗提取方法 | 第35页 |
| 13 拟南芥叶片及花RNA的提取以及RT-PCR检测 | 第35页 |
| 14 拟南芥营养体全蛋白的粗提取以及Western检测 | 第35-37页 |
| 实验结果 | 第37-54页 |
| 一、 CaN(Calcineurin)序列查找、同源性比对及点印迹实验 | 第37-39页 |
| 二、 质粒载体的构建 | 第39-49页 |
| 1 CaN小肽一连体和二连体的构建: | 第39-48页 |
| ·PCR连接信号肽和CaN小肽 | 第39-41页 |
| ·PCR连接CaN小肽和C-myc抗原标签 | 第41-42页 |
| ·CaN小肽一连体-pUC19-1CaN的构建 | 第42-45页 |
| ·pUC19-2CaN的构建 | 第45-48页 |
| 2 X-1CaN，X-2CaN连入二元载体pLBJ21，并将其转入农杆菌GV3101 | 第48-49页 |
| 三、 拟南芥的转化与筛选 | 第49-50页 |
| 四、 转基因后代的鉴定及表型分析结果 | 第50-54页 |
| 问题与讨论 | 第54-56页 |
| 一、 质粒构建 | 第54-55页 |
| 二、 拟南芥的转化与种子的筛选 | 第55页 |
| 三、 转基因植株的鉴定和表型观察 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 个人简历 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
