| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| ·生物法合成手性胺研究进展 | 第12-19页 |
| ·化学法合成光学纯手性胺 | 第12页 |
| ·生物催化手段获得手性胺 | 第12-13页 |
| ·使用水解酶的(动态)动力学拆分 | 第13页 |
| ·使用单胺氧化酶进行去消旋化 | 第13-14页 |
| ·使用胺脱氢酶的不对称合成 | 第14页 |
| ·通过酮亚胺的不对称还原 | 第14-15页 |
| ·通过ω-转氨酶的不对称合成 | 第15-16页 |
| ·小结 | 第16-19页 |
| ·单胺氧化酶去消旋化手性胺研究现状 | 第19-20页 |
| ·COMBINATORIAL ACTIVE-SITE SATURATION TEST(CASTING) | 第20-21页 |
| ·课题目标及主要研究内容 | 第21-23页 |
| ·课题目标 | 第21页 |
| ·主要研究内容 | 第21-23页 |
| 2. ASPERGILLUS NIGER单胺氧化酶突变体晶体结构分析 | 第23-25页 |
| 3. MAO-D5催化(-)-TETRABENAZINE的蛋白质工程学研究 | 第25-46页 |
| ·引言 | 第25-27页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·菌种与质粒 | 第27页 |
| ·试剂与器材 | 第27-28页 |
| ·培养基与溶液 | 第28-32页 |
| ·引物 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-38页 |
| ·分子对接 | 第32-33页 |
| ·反向PCR技术导入突变 | 第33-35页 |
| ·高效感受态制备 | 第35-36页 |
| ·饱和突变库构建 | 第36-37页 |
| ·饱和突变库的高通量筛选 | 第37-38页 |
| ·突变体对(-)-tetrabenazine催化能力的验证 | 第38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-44页 |
| ·分子对接 | 第38-41页 |
| ·W463~*突变体催化(-)-Tetrabenazine | 第41-43页 |
| ·463-467RANDOM突变库的构建及筛选 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 4. 通过半理性设计(CASTING)提高MAO-D5对于3-氨基-1苯基丁烷的活力 | 第46-72页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第47-53页 |
| ·菌种与质粒 | 第47页 |
| ·试剂与器材 | 第47-49页 |
| ·培养基与溶液 | 第49-52页 |
| ·引物 | 第52-53页 |
| ·试验方法 | 第53-61页 |
| ·分子对接 | 第53页 |
| ·反向PCR技术导入突变 | 第53-54页 |
| ·高效感受态制备 | 第54-55页 |
| ·饱和突变库构建 | 第55-56页 |
| ·饱和突变库的高通量筛选 | 第56-57页 |
| ·所得突变体的复筛 | 第57页 |
| ·蛋白质纯化与定量 | 第57-60页 |
| ·酶活测定 | 第60-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-71页 |
| ·分子对接 | 第61-62页 |
| ·Phe204与Leu207饱和突变库的构建 | 第62-63页 |
| ·Phe204与Leu207饱和突变库的筛选 | 第63-64页 |
| ·Phe204与Leu207饱和突变库的复筛 | 第64-65页 |
| ·所得突变的表达与纯化 | 第65-68页 |
| ·突变体突变分析 | 第68页 |
| ·突变后MAO-D5拆分消旋3-氨基-1苯基丁烷 | 第68-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 5. 结论与展望 | 第72-75页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| ·展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 作者简历及在学期间所发论文 | 第80页 |
