| 摘要 | 第1-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 农杆菌介导的遗传转化 | 第13-19页 |
| ·农杆菌的研究历史 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化的优点 | 第14页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化机理 | 第14-16页 |
| ·T-DNA | 第14页 |
| ·Vir基因 | 第14-16页 |
| ·T-DNA复合物的跨膜转移 | 第16页 |
| ·农杆菌转化应用范围和方法的拓展 | 第16-19页 |
| ·真菌的转化 | 第16-17页 |
| ·裸子植物的转化 | 第17页 |
| ·单子叶植物的转化 | 第17-19页 |
| ·农杆菌转化方法及拓展 | 第19页 |
| 2 植物遗传转化的其它方法 | 第19-23页 |
| ·基因枪法(Particle gun) | 第19-20页 |
| ·PEG法 | 第20页 |
| ·电激法(Electroporation)介导基因转化 | 第20-21页 |
| ·显微注射介导基因转化(Microinjection) | 第21页 |
| ·脂质体介导基因转化 | 第21页 |
| ·花粉管通道法(Pollen-tube pathway) | 第21-22页 |
| ·碳化硅纤维法(Silicon carbide fiber-mediated method) | 第22页 |
| ·超声波法 | 第22页 |
| ·激光微束介导基因转化法 | 第22-23页 |
| 3 类胡萝卜素合成途径及其相关的基因 | 第23-28页 |
| ·类胡萝卜素的性质与分布 | 第23页 |
| ·类胡萝卜素的基本结构 | 第23页 |
| ·类胡萝卜素的生物学功能 | 第23-24页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第24-26页 |
| ·植物类胡萝卜素生物合成的基因工程研究 | 第26-28页 |
| ·类胡萝卜素生物合成主要酶及其基因 | 第26-27页 |
| ·植物类胡萝卜素的基因工程研究 | 第27-28页 |
| 4 本研究的意义 | 第28-30页 |
| ·LycB基因 | 第28页 |
| ·β-胡萝卜素 | 第28页 |
| ·果蔬是人类最重要的类胡萝卜素来源 | 第28页 |
| ·番茄是人们十分喜爱的果菜两用作物 | 第28-29页 |
| ·菊花是我国传统名花和世界最主要的切花之一 | 第29-30页 |
| 第二部分 研究内容 | 第30-64页 |
| 实验一 利用农杆菌介导法将类胡萝卜素合成酶基因LycB导入番茄的研究 | 第30-52页 |
| 1 材料与方法 | 第31-42页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·植物材料与转化受体 | 第31页 |
| ·质粒和菌株 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33页 |
| ·酶和生化试剂 | 第33页 |
| ·引物 | 第33页 |
| ·试验设计 | 第33-34页 |
| ·Hyg适宜筛选浓度的确立 | 第33-34页 |
| ·农杆菌转化因子试验 | 第34页 |
| ·实验结果调查与数据处理 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-42页 |
| ·植物材料的培养 | 第34页 |
| ·质粒检测 | 第34-36页 |
| ·细菌菌株及培养 | 第36页 |
| ·外植体的侵染转化 | 第36页 |
| ·共培养 | 第36页 |
| ·脱菌筛选培养 | 第36-37页 |
| ·生根培养与移栽 | 第37页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·PCR-Southern检测 | 第38-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·质粒DNA电泳分析 | 第42页 |
| ·潮霉素(Hyg)筛选浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·农杆菌侵染的效果 | 第43页 |
| ·预处理对番茄抗性愈伤诱导率的影响 | 第43-44页 |
| ·侵染时间对番茄抗性愈伤诱导率的影响 | 第44-45页 |
| ·农杆菌菌液浓度对番茄抗性愈伤诱导率的影响 | 第45-46页 |
| ·乙酰丁香酮浓度对番茄抗性愈伤诱导率的影响 | 第46-47页 |
| ·延迟筛选对番茄转化的影响 | 第47-48页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第48-49页 |
| ·PCR-Southern检测 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 实验二 利用农杆菌介导法将类胡萝卜素合成酶基因LycB导入菊花的研究 | 第52-64页 |
| 1 材料与方法 | 第53-56页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·植物材料和转化受体 | 第53页 |
| ·质粒和菌株 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53-54页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第54页 |
| ·试验设计 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·质粒的检测 | 第54页 |
| ·细菌菌株及培养 | 第54页 |
| ·选择压力的确定 | 第54-55页 |
| ·愈伤组织的侵染转化 | 第55页 |
| ·共培养 | 第55页 |
| ·脱菌筛选培养 | 第55页 |
| ·分化培养 | 第55页 |
| ·生根与移栽培养 | 第55页 |
| ·抗性愈伤组织与抗性苗的PCR检测 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-62页 |
| ·质粒检测结果 | 第56页 |
| ·筛选压力的确定 | 第56-57页 |
| ·侵染时间对菊花抗性愈伤率的影响 | 第57-58页 |
| ·农杆菌菌液浓度对菊花抗性愈伤率的影响 | 第58-59页 |
| ·共培养时间对菊花抗性愈伤率的影响 | 第59-60页 |
| ·AS浓度对菊花抗性愈伤率的影响 | 第60-61页 |
| ·不同筛选方式对菊花抗性愈伤率的影响 | 第61页 |
| ·抗性愈伤组织与抗性苗的PCR检测 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 个人简历 | 第74-76页 |
| 英文摘要 | 第76-78页 |
| 附录 | 第78-82页 |
