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小麦紫黄质脱环氧化酶基因的克隆及其表达研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
英文符号、缩略语及其说明第12-14页
第一部分 文献综述第14-29页
第二部分 研究论文第29页
前言第29-31页
第一章 小麦紫黄质脱环氧化酶基因的克隆第31-53页
 1 材料与方法第31-37页
  1.1 实验材料第31-32页
  1.2 试验方法第32-37页
   1.2.1 总RNA的提取第32-33页
   1.2.2 反转录CDNA第一条链的合成第33页
   1.2.3 目的基因CDNA片段的分离第33-36页
   1.2.4 目的基因3’末端片段的分离第36-37页
   1.2.5 目的基因5’端片段的分离第37页
 2 结果与分析第37-51页
  2.1 小麦总RNA的提取第37页
  2.2 小麦VDE基因的克隆第37-51页
   2.2.1 小麦VDE基因中间片段的克隆第38-39页
   2.2.2 小麦VDE基因3’端片段的克隆第39-42页
   2.2.3 小麦VDE基因5端片段的克隆第42-43页
   2.2.4 小麦VDE基因的全系列第43-45页
   2.2.5 小麦VDE基因的生化特征第45-48页
   2.2.6 VDE基因的同源性比较第48-51页
 3 讨论第51-53页
第二章 反义WVDE基因表达载体的构建和烟草的转化第53-63页
 1 材料与方法第53-59页
  1.1 材料第53页
   1.1.1 植物材料第53页
   1.1.2 菌株与质粒第53页
   1.1.3 酶及生化试剂第53页
   1.1.4 PCR引物第53页
  1.2 试验方法第53-56页
   1.2.1 反义WVDE基因表达载体的构建第53-55页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化第55页
   1.2.3 感受态细胞的制备第55页
   1.2.4 冻融法转化农杆菌第55-56页
   1.2.5 农杆菌介导转化烟草第56页
  1.3 转基因烟草的分子鉴定第56-59页
   1.3.1 烟草基因组DNA的提取第56-57页
   1.3.2 转基因植株的PCR鉴定第57-58页
   1.3.3 SOUTHERN杂交分析第58-59页
 2 结果与分析第59-62页
  2.1 表达载体的构建第59页
  2.2 烟草的转化情况第59-60页
  2.3 转基因烟草的RT-PCR检测第60-61页
  2.4 转基因烟草的Southern分析第61-62页
 3 讨论第62-63页
第三章 小麦和转基因烟草VDE的表达研究第63-80页
 1 材料与方法第63-64页
  1.1 实验材料第63页
   1.1.1 植物材料第63页
   1.1.2 菌株与质粒第63页
   1.1.3 酶及生化试剂第63页
   1.1.4 PCR引物第63页
  1.2 实验方法第63-64页
   1.2.1 荧光参数的测定第63-64页
   1.2.2 叶黄素组分的测定第64页
   1.2.3 PCR-SOUTHERN杂交分析第64页
 2 结果与分析第64-74页
  2.1 小麦WVDE表达的日变化第64-68页
   2.1.1 小麦WVDERT-PCRSOUTHERN检测第65页
   2.1.2 小麦叶片的荧光参数的变化第65-67页
   2.1.3 小麦叶片中叶黄素循环脱环氧化状态的变化第67-68页
  2.2 转基因烟草荧光参数的变化第68-74页
   2.2.1 低温条件下转基因烟草荧光参数的变化第68-70页
   2.2.2 强光条件下转基因烟草荧光参数的变化第70页
   2.2.3 盐胁迫下转基因烟草中荧光参数的变化第70-72页
   2.2.4 转基因烟草中荧光参数的日变化第72-74页
 3 讨论第74-78页
 4 结论第78-79页
 5 下一步的工作设想第79-80页
参考文献第80-95页
附录第95-97页
致谢第97-98页

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