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胰岛素调控大鼠肝癌细胞系报告基因表达的研究

英文缩写第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-12页
前言第12-15页
实验材料第15-21页
 一、工具酶第15页
 二、细胞培养及转染试剂第15页
 三、主要生化试剂第15页
 四、菌株第15页
 五、细胞株第15页
 六、质粒第15-16页
 七、主要仪器设备第16-21页
实验方法第21-28页
 一、荧光素酶报告质粒pGL2-PEPCK-luc的构建及鉴定第21-25页
  1.质粒DNA的碱法小量制备第21-22页
  2.质粒DNA的大量制备第22页
  3.质粒的纯化第22-23页
  4.DNA限制性内切酶酶切及其他酶的处理第23页
  5.从琼脂糖凝胶中回收DNA片段第23-24页
  6.DNA片段的连接第24页
  7.感受态大肠杆菌的制备第24-25页
  8.质粒的转化和鉴定第25页
  9.质粒DNA的双链测序第25页
 二、荧光素酶报告基因在肝细胞系中的瞬时表达及酶活性的测定第25-27页
  1.细胞培养第25-26页
  2.Lipofectin~(TM)法转染细胞第26页
  3.转染细胞荧光素酶表达活性的测定第26-27页
 三,荧光素酶报告质粒的体外表达实验第27-28页
结果第28-53页
 一、克隆质粒的酶切图谱分析及核苷酸序列测定第28-33页
  1.中间载体质粒的构建和鉴定第28-30页
  2.荧光素酶报告质粒pGL2-PEPCK-Luc的构建及鉴定第30-33页
 二、荧光报告质粒在肝细胞内基因转录调控的研究第33-53页
  1.脂质体法转染大鼠肝癌细胞系及瞬时表达荧光素酶活性的测定第33-34页
  2.PEPCK启动子序列在肝细胞内对基因转录的调节第34-53页
讨论第53-59页
参考文献第59-63页
致谢第63-64页
综述1第64-85页
 参考文献第75-85页
综述2第85-97页
 参考文献第91-97页
简历第97页

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