| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第7-13页 |
| ·蛋白激酶简介 | 第7-8页 |
| ·精子发生过程 | 第8-10页 |
| ·睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的研究现状及进展 | 第10-12页 |
| ·研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 2 实验材料与方法 | 第13-31页 |
| ·实验材料 | 第13-18页 |
| ·菌株、载体和样品 | 第13-14页 |
| ·常用试剂配制 | 第14-17页 |
| ·引物的设计与合成 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要的计算机分析软件及网站 | 第18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-31页 |
| ·Tssk2基因克隆 | 第19-23页 |
| ·总RNA提取 | 第19-20页 |
| ·Tssk2基因PCR扩增实验 | 第20-21页 |
| ·Tssk2基因克隆PCR产物片段回收及筛选 | 第21-22页 |
| ·Tssk2基因克隆测序分析 | 第22-23页 |
| ·Tssk2基因亚克隆 | 第23-26页 |
| ·Tssk2质粒亚克隆PCR扩增实验 | 第24-25页 |
| ·酶切反应及酶切产物的连接转化实验 | 第25-26页 |
| ·Tssk2基因亚克隆测序分析 | 第26页 |
| ·Tssk2重组蛋白表达与提纯 | 第26-29页 |
| ·IPTG诱导Tssk2重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
| ·Tssk2重组蛋白的提取与纯化 | 第27-28页 |
| ·Westernblot分析蛋白样品 | 第28-29页 |
| ·Tssk2蛋白在小鼠及人精子中的表达和亚细胞定位 | 第29-31页 |
| ·小鼠精子蛋白质的提取 | 第29页 |
| ·人精子蛋白质的提取 | 第29页 |
| ·Tssk2蛋白在小鼠精子中的亚细胞定位 | 第29-30页 |
| ·Tssk2蛋白在人精子中的亚细胞定位 | 第30-31页 |
| 3 实验结果与分析 | 第31-48页 |
| ·TSSK2基因克隆结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总RNA提取结果与分析 | 第31-32页 |
| ·Tssk2基因PCR扩增及筛选结果与分析 | 第32-34页 |
| ·Tssk2基因克隆测序结果与分析 | 第34-36页 |
| ·TSSK2基因亚克隆结果与分析 | 第36-42页 |
| ·Tssk2基因亚克隆PCR扩增及回收纯化结果与分析 | 第36-37页 |
| ·Tssk2基因亚克隆PCR产物片段的筛选与鉴定 | 第37-40页 |
| ·Tssk2基因亚克隆测序结果与分析 | 第40-42页 |
| ·TSSK2重组蛋白表达与提纯结果与分析 | 第42-46页 |
| ·不同诱导条件诱导Tssk2重组蛋白表达的SDS-PAGE检测分析 | 第42-44页 |
| ·Westernblot分析鉴定Tssk2重组蛋白 | 第44-46页 |
| ·TSSK2蛋白在小鼠及人精子中的亚细胞定位结果与分析 | 第46-48页 |
| ·Tssk2蛋白在小鼠精子中的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| ·Tssk2蛋白在人精子中的亚细胞定位 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·TSSK2基因克隆及序列分析 | 第48页 |
| ·TSSK2基因表达系统的选择及原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·TSSK2蛋白原核表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·小鼠TSSK2重组蛋白的鉴定分析 | 第50-51页 |
| ·TSSK2蛋白在小鼠及人精子中的亚细胞定位 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 6 创新点 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
| 在校期间文章发表及获奖情况 | 第61页 |
