| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一部分 概述 | 第14-36页 |
| 一、纳米医学与基因治疗 | 第14-29页 |
| 1. 纳米医学的定义 | 第14页 |
| 2. 纳米医学的应用 | 第14-18页 |
| 3. 基因治疗 | 第18-21页 |
| 4. 纳米医学在基因治疗领域内的应用 | 第21-26页 |
| 5. 壳聚糖作为DNA载体的研究进展 | 第26-29页 |
| 二、研究背景 | 第29-30页 |
| 三、研究目的、意义、思路、步骤及内容 | 第30-32页 |
| 1、研究目的 | 第30页 |
| 2、研究意义 | 第30-31页 |
| 3、基本思路 | 第31页 |
| 4、研究步骤及内容 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-36页 |
| 第二部分 纳米基因转移系统的制备和表征 | 第36-47页 |
| 一、实验方法 | 第36-40页 |
| 1. 实验材料 | 第36页 |
| 2.LMWC的制备及FITC的标记 | 第36-37页 |
| 3.LMWC分子量和氨基百分含量的测定 | 第37-38页 |
| 4. 质粒的扩增和纯化 | 第38-39页 |
| 5.DNA纳米微粒的复合制备 | 第39页 |
| 6.DNA纳米微粒的形态学观察 | 第39页 |
| 7.DNA纳米微粒的平均粒径和Zeta电位的测定 | 第39页 |
| 8. 酶切保护试验 | 第39-40页 |
| 二、主要实验结果 | 第40-46页 |
| 1.LMWC的制备及FITC的标记 | 第40-41页 |
| 2.LMWC分子量和氨基百分含量的测定 | 第41-44页 |
| 3. 质粒的扩增和纯化 | 第44页 |
| 4.DNA纳米微粒的表观特征 | 第44-45页 |
| 5. 酶切保护试验结果 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 第三部分 兔关节软骨细胞的分离培养与冻存复苏 | 第47-55页 |
| 一、实验方法 | 第47-49页 |
| 1. 实验材料 | 第47页 |
| 2. 软骨细胞的分离获取 | 第47-48页 |
| 3. 软骨细胞的原代及传代培养 | 第48页 |
| 4. 关节软骨细胞的冻存与复苏 | 第48页 |
| 5. 细胞计数法绘制细胞增殖曲线 | 第48-49页 |
| 6. 软骨细胞的GAGs组织化学染色 | 第49页 |
| 二、主要实验结果 | 第49-54页 |
| 1. 软骨细胞的分离获取 | 第49页 |
| 2. 倒置显微镜观察 | 第49-51页 |
| 3. 细胞增殖曲线 | 第51-52页 |
| 4. 细胞组织化学染色结果 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第四部分 载基因低分子量壳聚糖纳米微粒体外转染特性研究 | 第55-65页 |
| 一、实验方法 | 第55-60页 |
| 1. 实验材料 | 第55-56页 |
| 2. 体外报告基因转染软骨细胞试验 | 第56-59页 |
| 3. 体外报告基因转染软骨组织块试验 | 第59页 |
| 4. 体外对软骨细胞的细胞毒性试验 | 第59-60页 |
| 二、主要实验结果 | 第60-64页 |
| 1. 体外报告基因转染软骨细胞试验的结果 | 第60-63页 |
| 2. 体外报告基因转染软骨组织块试验的结果 | 第63-64页 |
| 3. 体外对软骨细胞的细胞毒性试验的结果 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 第五部分 载基因低分子量壳聚糖纳米微粒体内转染特性研究 | 第65-70页 |
| 一、实验方法 | 第65-67页 |
| 1. 实验材料 | 第65-66页 |
| 2. 全层软骨缺损的动物模型 | 第66页 |
| 3. 体内报告基因转染软骨细胞试验 | 第66页 |
| 4. 安全性评价 | 第66页 |
| 5. 体内生长因子基因转染软骨细胞试验 | 第66-67页 |
| 二、主要实验结果 | 第67-69页 |
| 1. 动物模型一般情况 | 第67页 |
| 2. 体内报告基因转染软骨细胞结果 | 第67-68页 |
| 3. 安全性评价 | 第68页 |
| 4. 体内生长因子基因转染软骨细胞的结果 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 第六部分 新型纳米非病毒基因转运系统治疗软骨缺损的研究 | 第70-77页 |
| 一、实验方法 | 第70-71页 |
| 1. 实验材料 | 第70-71页 |
| 2. 体内动物模型转染修复软骨缺损的实验 | 第71页 |
| 二、主要实验结果 | 第71-76页 |
| 1. 动物模型一般情况 | 第71页 |
| 2. 体内动物模型转染转染治疗软骨缺损的结果 | 第71-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| 第七部分 纳米DNA传输系统在假体无菌性松动模型中的应用 | 第77-87页 |
| 一、实验方法 | 第77-81页 |
| 1. 实验材料 | 第77-78页 |
| 2. 载ASO纳米复合物颗粒的制备 | 第78页 |
| 3.Co-Cr-Mo 合金粉末处理 | 第78页 |
| 4. 磨损微粒诱导的骨溶解动物模型的建立 | 第78-79页 |
| 5. 实验分组与给药 | 第79页 |
| 6. 载ASO的纳米微粒原位转染抑制骨溶解的研究 | 第79-81页 |
| 二、主要实验结果 | 第81-85页 |
| 1. 动物模型一般情况 | 第81页 |
| 2. 复合物对TNF-α表达的抑制作用 | 第81-82页 |
| 3. 破骨细胞TRAP染色和TRAP定量 | 第82-83页 |
| 4. 骨吸收陷窝的观察和积分 | 第83-84页 |
| 5.TNF-α再次给予实验 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 第八部分 纳米DNA传输系统在类风湿关节炎模型中的应用 | 第87-94页 |
| 一、实验方法 | 第87-89页 |
| 1. 实验材料 | 第87-88页 |
| 2. 载ASO纳米复合物颗粒的制备 | 第88页 |
| 3. 类风湿关节炎解动物模型的建立 | 第88页 |
| 4. 实验分组与给药 | 第88-89页 |
| 5. 载ASO的纳米微粒原位转染治疗类风湿关节炎的研究 | 第89页 |
| 二、主要实验结果 | 第89-93页 |
| 1. 动物模型一般情况 | 第89-90页 |
| 2. 纳米DNA传输系统在类风湿关节炎中的应用 | 第90-93页 |
| 参考文献 | 第93-94页 |
| 第九部分 讨论 | 第94-106页 |
| 一、新型纳米非病毒基因转运系统治疗软骨缺损的研究 | 第94-97页 |
| 1. 软骨的损伤与修复 | 第94页 |
| 2. 软骨缺损的动物模型 | 第94-95页 |
| 3.TGF-β1 与软骨修复 | 第95页 |
| 4. 基因治疗与软骨修复 | 第95-96页 |
| 5. 降解后的壳聚糖作为基因载体 | 第96页 |
| 6. 针对关节软骨和关节内环境的考量 | 第96-97页 |
| 二、纳米DNA传输系统在假体无菌性松动模型中的应用 | 第97-100页 |
| 1.TNF-α与假体松动 | 第97-98页 |
| 2. 抗TNF-α治疗与假体松动 | 第98-99页 |
| 3. 抗TNF-α的ASO | 第99-100页 |
| 4. 抗TNF-α的ASO 抑制微粒诱导的骨溶解 | 第100页 |
| 三、纳米DNA传输系统在类风湿关节炎模型中的初步应用 | 第100-103页 |
| 1.TNF-α与RA | 第100-101页 |
| 2. 抗TNF-α的生物制剂与RA的治疗 | 第101-102页 |
| 3. 抗TNF-α治疗的安全性与有效性 | 第102-103页 |
| 4. 抗TNF-α的ASO 治疗RA | 第103页 |
| 参考文献 | 第103-106页 |
| 文献综述一 | 第106-110页 |
| 参考文献 | 第109-110页 |
| 文献综述二 | 第110-116页 |
| 参考文献 | 第115-116页 |
| 文献综述三 | 第116-124页 |
| 参考文献 | 第122-124页 |
| 文献综述四 | 第124-131页 |
| 参考文献 | 第128-131页 |
| 参考文献 | 第131-145页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
