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香蕉胚性悬浮细胞超低温保存及遗传转化的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 文献综述第12-24页
 1 香蕉生物技术研究进展第12-17页
   ·香蕉离体培养研究进展第12-14页
     ·器官发生途径第12-13页
     ·体细胞胚发生途径第13-14页
   ·香蕉遗传转化研究进展第14-17页
     ·香蕉转基因受体系统的建立第15-16页
     ·香蕉遗传转化系统第16-17页
 2 植物种质超低温保存研究进展第17-23页
   ·超低温保存技术优点第18页
   ·超低温保存技术原理第18-19页
   ·影响超低温保存的主要因素第19-22页
     ·材料的选择第19页
     ·预处理第19页
     ·冰冻保护剂第19-20页
     ·冰冻方法第20-21页
     ·化冻第21-22页
     ·化冻后处理第22页
     ·生活力测定第22页
   ·超低温保存后细胞的超微结构观察第22-23页
 3 本研究的目的与意义第23-24页
第二章 香蕉体细胞胚胎发生途径植株再生体系的优化研究第24-31页
 1 材料与方法第24-26页
   ·材料第24页
   ·方法第24-26页
     ·外植体的选择与处理第24-25页
     ·愈伤组织的诱导,胚性愈伤组织的选择和继代培养第25页
     ·悬浮培养第25页
     ·体细胞胚的诱导和成熟第25-26页
     ·植株再生第26页
     ·培养条件第26页
 2 结果与分析第26-29页
   ·不同植物生长调节剂2,4-D和Picloram诱导愈伤组织的效果比较第26-27页
     ·2,4-D诱导愈伤组织的效果第26-27页
     ·Picloram诱导愈伤组织的效果第27页
   ·ABA对香蕉体细胞胚诱导、萌发和再生的影响第27-29页
     ·ABA对体细胞胚诱导的影响第27-28页
     ·ABA对体细胞胚萌发和再生的影响第28-29页
 3 讨论第29-31页
   ·2,4-D和Picloram对香蕉愈伤组织诱导的影响第29页
   ·ABA对香蕉体细胞胚发生的影响第29-31页
第三章 贡蕉胚性细胞悬浮系超低温保存的研究第31-44页
 1 材料与方法第32-35页
   ·材料第32页
   ·方法第32-35页
     ·贡蕉胚性细胞悬浮系的建立和继代培养第32页
     ·玻璃化超低温保存第32-34页
     ·超微结构观察的样品处理第34-35页
     ·数据统计分析第35页
 2 结果与分析第35-42页
   ·香蕉胚性悬浮细胞玻璃化超低温保存技术体系的建立第35-40页
     ·利用正交设计方法优化超低温保存技术体系第35-37页
     ·单因子试验第37-40页
   ·香蕉胚性细胞玻璃化法超低温保存过程中细胞超微结构的变化第40-42页
     ·正常生长的胚性悬浮细胞(对照)的超微结构特点第40页
     ·经过预培养2d后的细胞超微结构的变化第40-41页
     ·经过装载液处理后的细胞结构特点第41页
     ·经过PVS_2处理后的细胞结构特点第41页
     ·在液氮中保存24h后迅速解冻的细胞结构特点第41页
     ·恢复生长7d的细胞超微结构第41-42页
 3 讨论第42-44页
   ·胚性细胞玻璃化法超低温保存第42-43页
   ·超低温保存过程中胚性悬浮细胞的超微结构变化第43-44页
第四章 香蕉胚性悬浮细胞遗传转化体系研究第44-55页
 1 材料与方法第44-49页
   ·材料第44-47页
     ·植物材料第45页
     ·根癌农杆菌菌株与质粒第45页
     ·培养基第45-46页
     ·抗生素、AS及GUS检测液配方第46-47页
   ·试验方法第47-49页
     ·选择培养中Hyg选择压的确定第47页
     ·转化程序第47页
     ·转化因子的筛选第47-48页
     ·GUS报告基因的检测第48-49页
 2 结果与分析第49-52页
   ·选择培养中Hyg选择压的确定第49-50页
   ·转化因子的筛选第50-52页
     ·菌液浓度对根癌农杆菌转化的影响第50页
     ·共培养时间对根癌农杆菌转化的影响第50-51页
     ·侵染时间对根癌农杆菌转化的影响第51页
     ·不同侵染方式对根癌农杆菌转化的影响第51-52页
   ·转化体的筛选及转化植株的获得第52页
 3 讨论第52-55页
   ·酚类物质对农杆菌感染香蕉悬浮细胞的影响第53页
   ·农杆菌菌液对香蕉胚性细胞瞬时表达率的影响第53-54页
   ·共培养时间对香蕉胚性细胞瞬时表达率的影响第54页
   ·不同侵染方式对香蕉胚性细胞瞬时表达率的影响第54-55页
第五章 总结第55-57页
 1 结论第55-56页
 2 进一步研究的内容第56-57页
参考文献第57-67页
附录(图版与说明)第67-78页
缩略词表第78-79页
致谢第79-80页
作者简历第80页

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