| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-27页 |
| ·生物柴油概述 | 第14-17页 |
| ·生物柴油的基本性质 | 第14-15页 |
| ·生物柴油的发展概况 | 第15-16页 |
| ·生物柴油生产方法研究情况 | 第16-17页 |
| ·微生物脂肪酶的研究进展 | 第17-20页 |
| ·合成脂肪酶菌种及其选育 | 第17-18页 |
| ·脂肪酶发酵工艺研究进展 | 第18-19页 |
| ·脂肪酶的结构、性质与催化机理 | 第19-20页 |
| ·脂肪酶固定化的研究情况 | 第20-23页 |
| ·吸附法 | 第21页 |
| ·交联法 | 第21-22页 |
| ·共价结合法 | 第22-23页 |
| ·包埋法 | 第23页 |
| ·脂肪酶在非水相介质中的催化特性 | 第23-24页 |
| ·酶法合成生物柴油的工艺研究进展 | 第24-25页 |
| ·脂肪酶的甲醇失活效应 | 第24页 |
| ·间歇式酶法催化酯交换 | 第24-25页 |
| ·连续式酶法催化酯交换 | 第25页 |
| ·论文的研究意义和技术框架 | 第25-27页 |
| ·论文研究的意义 | 第25-26页 |
| ·技术框架 | 第26-27页 |
| 第2章 材料与方法 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·土壤样品来源 | 第27页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27-29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·产脂肪酶菌种的筛选 | 第30页 |
| ·菌株形态学分析方法 | 第30页 |
| ·菌株18SrDNA 序列分析 | 第30页 |
| ·18SrDNA 基因分析方法 | 第30-31页 |
| ·脂肪酶的分离纯化 | 第31页 |
| ·固定化脂肪酶的制备 | 第31页 |
| ·转酯化反应条件 | 第31页 |
| ·油脂脂肪酸含量分析 | 第31页 |
| ·生物柴油的转化率 | 第31-32页 |
| ·分析方法 | 第32-36页 |
| ·脂肪酶活性的测定 | 第32页 |
| ·菌体生物量的测定 | 第32页 |
| ·pH 值的测定 | 第32页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第32-33页 |
| ·固定化酶固定化效率及表观活力回收率的测定 | 第33页 |
| ·生物柴油的测定 | 第33页 |
| ·线性关系方法学验证 | 第33-34页 |
| ·精密度实验 | 第34页 |
| ·回收率实验 | 第34-36页 |
| 第3章 脂肪酶产生菌株的筛选与鉴定 | 第36-42页 |
| 引言 | 第36页 |
| ·脂肪酶产生菌株的分离和筛选 | 第36-37页 |
| ·菌株筛选方法的建立 | 第36-37页 |
| ·目标菌株的筛选 | 第37页 |
| ·脂肪酶产生菌株的鉴定 | 第37-40页 |
| ·菌落、菌株形态观察 | 第37-38页 |
| ·18SrDNA 核酸特征分析 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第4章 菌株 Aspergillus niger Li-38 脂肪酶表达特性的研究 | 第42-51页 |
| 引言 | 第42页 |
| ·菌株 A. niger Li-38 的发酵产酶进程动力学 | 第42-43页 |
| ·培养温度对菌株A. niger Li-38 脂肪酶合成的影响 | 第43-44页 |
| ·初始pH 对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·不同碳源对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第45-46页 |
| ·不同氮源对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·添加表面活性剂Tween80对菌株A. niger Li-38产酶的影响 | 第47页 |
| ·无机离子对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·装液量对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第48页 |
| ·接种量对菌株A. niger Li-38 产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·正交实验优化各主要因素对菌株 A. niger Li-38 产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第5章 菌株 Aspergillus niger Li-38 的诱变选育 | 第51-66页 |
| 引言 | 第51页 |
| ·菌株诱变策略建立 | 第51页 |
| ·透明圈初筛策略的依据与优化 | 第51-53页 |
| ·透明圈初筛策略的依据 | 第51-52页 |
| ·筛选模型条件的优化 | 第52-53页 |
| ·菌株 A.niger Li-38 孢子诱变筛选策略 | 第53-57页 |
| ·DES浓度及处理时间对的致死率的影响 | 第53-54页 |
| ·紫外照射时间对致死率的影响 | 第54-56页 |
| ·微波+光波照射时间对致死率的影响 | 第56-57页 |
| ·复合诱变处理对致死率的影响结果 | 第57页 |
| ·菌株 A.niger Li-38 原生质体制备、诱变 | 第57-64页 |
| ·原生质体制备、诱变策略 | 第57-58页 |
| ·原生质体制备条件优化 | 第58-60页 |
| ·DES 浓度及处理时间对原生质致死率的影响 | 第60-61页 |
| ·紫外照射时间对原生质体致死率的影响 | 第61-62页 |
| ·两因素复合诱变处理的综合影响 | 第62-64页 |
| ·MLi-38 遗传稳定性的研究 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第6章 Aspergillus niger Li-38脂肪酶的催化反应特性 | 第66-73页 |
| 引言 | 第66页 |
| ·温度对脂肪酶活性的影响 | 第66-69页 |
| ·最适反应温度 | 第66-68页 |
| ·热稳定性 | 第68-69页 |
| ·pH 对脂肪酶活性的影响 | 第69-70页 |
| ·最适反应pH | 第69页 |
| ·pH稳定性 | 第69-70页 |
| ·金属离子对脂肪酶活性的影响 | 第70页 |
| ·底物浓度对脂肪酶水解活性的影响及动力学参数 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第7章 固定酶的制备及催化合成生物柴油的研究 | 第73-84页 |
| 引言 | 第73页 |
| ·脂肪酶固定化方法的比较 | 第73-74页 |
| ·吸附固定化法 | 第73-74页 |
| ·交联固定法 | 第74页 |
| ·壳聚糖固定化酶固定化条件优化 | 第74-76页 |
| ·戊二醛浓度的影响 | 第74-75页 |
| ·交联时间的影响 | 第75-76页 |
| ·固定化酶酯交换反应催化体系条件优化 | 第76-80页 |
| ·醇油比对转化率的影响 | 第76-77页 |
| ·有机溶剂对转化率的影响 | 第77-78页 |
| ·水分含量对转化率的影响 | 第78页 |
| ·温度对转化率的影响 | 第78-79页 |
| ·加酶量对转化率的影响 | 第79-80页 |
| ·分批补加甲醇对酯化率的影响 | 第80页 |
| ·固定化酶和游离酶的性质比较 | 第80-83页 |
| ·固定化酶和游离酶的贮存稳定性对比 | 第80-81页 |
| ·固定化酶和游离酶的温度和pH 稳定性 | 第81-82页 |
| ·酶的操作稳定性实验 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第8章 结论与展望 | 第84-87页 |
| ·结论 | 第84-85页 |
| ·展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 附录 | 第92-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简介 | 第96-97页 |
| 导师评阅表 | 第97页 |
