| 中文摘要 | 第1-18页 |
| 英文摘要 | 第18-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-71页 |
| 1 桑树黄化型萎缩病的研究进展 | 第21-36页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病症研究 | 第21-22页 |
| ·桑黄化型萎缩病病原研究 | 第22-27页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的发现 | 第22-23页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的特性 | 第23-24页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的分离、保存 | 第24-25页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原检测 | 第25-26页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的分类 | 第26-27页 |
| ·桑树黄化型萎缩病发病机理的研究 | 第27-30页 |
| ·桑黄化型萎缩病的传染途径与流行规律研究 | 第30-31页 |
| ·桑树黄化型萎缩病的传染途径 | 第30-31页 |
| ·桑树黄化型萎缩病发生、流行的影响因素 | 第31页 |
| ·桑树黄化型萎缩病的防治技术研究 | 第31-35页 |
| ·桑树黄化型萎缩病药物防治技术 | 第31-32页 |
| ·桑品种抗病性鉴定技术 | 第32-33页 |
| ·无病良种桑苗培育技术 | 第33页 |
| ·治虫防病技术 | 第33-34页 |
| ·桑树肥水管理和采伐技术 | 第34页 |
| ·其它防治技术 | 第34-35页 |
| ·问题与展望 | 第35-36页 |
| 2 植物逆境胁迫差异蛋白质组学研究进展 | 第36-52页 |
| ·蛋白质组差异的产生原因及其表现形式 | 第37页 |
| ·差异蛋白质组学的研究方法 | 第37-40页 |
| ·双向电泳 | 第37页 |
| ·用于蛋白质定量和比较研究的质谱相关技术 | 第37-38页 |
| ·表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI)技术 | 第38页 |
| ·HPLC 及CE 技术 | 第38-39页 |
| ·SELDI 蛋白质芯片技术 | 第39页 |
| ·生物信息学分析 | 第39-40页 |
| ·差异蛋白质组学在植物非生物胁迫研究中的进展 | 第40-47页 |
| ·干旱胁迫 | 第40-41页 |
| ·盐渍胁迫 | 第41-43页 |
| ·低温胁迫 | 第43-44页 |
| ·机械损伤 | 第44页 |
| ·营养胁迫 | 第44-45页 |
| ·缺氧和其他非生物胁迫 | 第45-47页 |
| ·差异蛋白质组学在植物生物胁迫研究中的进展 | 第47-51页 |
| ·植物与共生微生物的关系 | 第47-48页 |
| ·植物与病原微生物的关系 | 第48-51页 |
| ·植物差异蛋白质组学面临的主要问题和展望 | 第51-52页 |
| 3 景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶研究进展 | 第52-59页 |
| ·SBPase 的生物化学研究 | 第52-53页 |
| ·SBPase 的分子生物学研究 | 第53-54页 |
| ·SBPase 的结构研究 | 第54-55页 |
| ·SBPase 基因的表达调控研究 | 第55-57页 |
| ·SBPase 的基因工程研究 | 第57-58页 |
| ·问题与展望 | 第58-59页 |
| 4 Rubisco 活化酶研究进展 | 第59-70页 |
| ·Rubisco 活化酶的分子特性 | 第59-63页 |
| ·Rubisco 活化酶对Rubisco 的活化机制 | 第63-64页 |
| ·环境因素对Rubisco 活化酶的影响 | 第64-67页 |
| ·温度 | 第64-66页 |
| ·CO_2 | 第66页 |
| ·光 | 第66页 |
| ·其它 | 第66-67页 |
| ·植物生长发育时期、品种和组织间Rubisco 活化酶的活性和表达差异 | 第67-68页 |
| ·Rubisco 活化酶的基因工程 | 第68-69页 |
| ·问题与展望 | 第69-70页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第70-71页 |
| 第二章 桑树黄化型萎缩病病原—植原体蛋白质组 Shotgun 策略分析 | 第71-102页 |
| 1 材料与方法 | 第72-78页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·其它材料 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-78页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病株透射电镜检测 | 第73页 |
| ·桑树黄化型萎缩病植原体的PCR 检测及进化树分析 | 第73-75页 |
| ·桑树叶片DNA 的提取 | 第73页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原—植原体的PCR 检测 | 第73-74页 |
| ·目的片段的回收 | 第74页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第74页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第74-75页 |
| ·大肠杆菌细胞的转化 | 第75页 |
| ·阳性克隆质粒的鉴定 | 第75页 |
| ·序列测定 | 第75页 |
| ·序列比对分析、进化树绘制 | 第75页 |
| ·植原体的提取与纯化 | 第75-76页 |
| ·植原体纯化物的电子显微镜检测 | 第76页 |
| ·植原体蛋白质的提取 | 第76页 |
| ·植原体蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第76页 |
| ·植原体蛋白质组的Shotgun 分析 | 第76-78页 |
| ·胶内酶解 | 第76-77页 |
| ·毛细管高效液相色谱 | 第77-78页 |
| ·质谱检测及蛋白鉴定 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-97页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病症 | 第78页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的PCR 检测及其进化树分析 | 第78-79页 |
| ·桑树黄化型萎缩病病原的电子显微镜检测 | 第79-80页 |
| ·纯化的植原体的电镜检测 | 第80页 |
| ·植原体蛋白质组的SDS-PAGE 分析 | 第80-81页 |
| ·植原体蛋白质组的Shotgun 分析 | 第81-97页 |
| 3 小结 | 第97页 |
| 4 讨论 | 第97-102页 |
| ·植原体的能量代谢 | 第97-100页 |
| ·植原体的毒力因子 | 第100页 |
| ·植原体假定蛋白 | 第100-102页 |
| 第三章 桑树黄化型萎缩病病原响应蛋白的蛋白质组学分析 | 第102-129页 |
| 1 材料与方法 | 第102-111页 |
| ·植物材料 | 第102-103页 |
| ·方法 | 第103-111页 |
| ·叶片超薄切片透射电镜观察 | 第103页 |
| ·桑树叶片蛋白质的提取 | 第103页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第103页 |
| ·蛋白质的定量 | 第103-104页 |
| ·桑树叶片蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第104页 |
| ·桑树叶片蛋白质的双向电泳 | 第104-106页 |
| ·第一向等电聚焦电泳 | 第104页 |
| ·IPG 胶条的平衡 | 第104-105页 |
| ·灌胶 | 第105-106页 |
| ·第二向SDS 电泳 | 第106页 |
| ·染色、脱色 | 第106页 |
| ·图象的扫描和分析 | 第106-107页 |
| ·差异点的胶内酶解 | 第107页 |
| ·MALDI-TOF-MS 质谱分析与数据检索 | 第107-108页 |
| ·MALDI-TOF/ TOF-MS 质谱分析与数据检索 | 第108页 |
| ·质谱鉴定的差异表达蛋白的功能分类分析 | 第108-109页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第109页 |
| ·叶片净光合速率的测定 | 第109页 |
| ·叶片羧化效率的测定 | 第109页 |
| ·荧光参数测定 | 第109-110页 |
| ·Rubisco 活性的测定 | 第110页 |
| ·SBPase 活性的测定 | 第110页 |
| ·桑树叶片可溶性糖及淀粉含量的测定 | 第110-111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-122页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片超微结构的影响 | 第111-112页 |
| ·植原体侵染对桑树生理生化特性的影响 | 第112-115页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片叶绿素含量的影响 | 第112页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片光合能力的影响 | 第112-113页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片羧化效率的影响 | 第113页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片荧光参数的影响 | 第113-114页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片淀粉及可溶性糖含量的影响 | 第114-115页 |
| ·植原体侵染对桑树叶片SBPase 和Rubisco 活性的影响 | 第115页 |
| ·桑树叶片的蛋白质单向电泳分析 | 第115-116页 |
| ·桑树叶片蛋白质的双向电泳分析 | 第116页 |
| ·差异表达蛋白点的质谱鉴定 | 第116-122页 |
| 3 小结 | 第122页 |
| 4 讨论 | 第122-129页 |
| ·植原体侵染促进叶绿体蛋白的降解 | 第122-123页 |
| ·病原响应蛋白的主要生理功能 | 第123-126页 |
| ·桑树黄化型萎缩病的发病机制 | 第126-129页 |
| 第四章 桑树黄化型萎缩病病原响应蛋白—景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因的克隆与表达分析 | 第129-161页 |
| 1 材料与方法 | 第130-142页 |
| ·材料 | 第130-131页 |
| ·植物材料 | 第130页 |
| ·PCR 引物 | 第130页 |
| ·载体 | 第130页 |
| ·其它材料 | 第130-131页 |
| ·方法 | 第131-142页 |
| ·MSBPase 的克隆 | 第131-135页 |
| ·总RNA 的提取 | 第131页 |
| ·cDNA 的合成 | 第131-132页 |
| ·MSBPase 中间片段的克隆 | 第132页 |
| ·MSBPase 的3'RACE | 第132-133页 |
| ·cDNA 同聚物加尾反应 | 第133页 |
| ·MSBPase 的5'RACE | 第133-134页 |
| ·MSBPase cDNA 编码区全长序列的获得 | 第134页 |
| ·目的片段的回收 | 第134页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第134页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第134页 |
| ·大肠杆菌细胞的转化 | 第134页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第134-135页 |
| ·阳性克隆质粒的鉴定 | 第135页 |
| ·序列测定 | 第135页 |
| ·MSBPase 序列分析 | 第135页 |
| ·MSBPase 所编码的蛋白质特性分析 | 第135页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第135页 |
| ·MSBPase 融合蛋白诱导表达与SDS-PAGE 电泳分析 | 第135页 |
| ·MSBPase 植物表达载体的构建与鉴定 | 第135-136页 |
| ·农杆菌GV3101 感受态细胞制备及转化 | 第136-137页 |
| ·拟南芥的无土栽培、转化 | 第137-138页 |
| ·拟南芥的无土栽培 | 第137页 |
| ·拟南芥转化方法 | 第137-138页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第138页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第138-141页 |
| ·总RNA 的提取 | 第138页 |
| ·甲醛变性凝胶电泳 | 第138-139页 |
| ·转膜 | 第139页 |
| ·预杂交 | 第139-140页 |
| ·探针的制备 | 第140页 |
| ·杂交 | 第140页 |
| ·洗膜 | 第140-141页 |
| ·放射自显影 | 第141页 |
| ·Western 杂交分析 | 第141-142页 |
| ·抗体的制备 | 第141页 |
| ·抗血清效价的测定（试管微量沉淀法） | 第141页 |
| ·Western 杂交 | 第141-142页 |
| ·转基因植株的表型分析及相关生理生化指标的测定 | 第142页 |
| ·植株干重的测定 | 第142页 |
| ·转基因植株其它生理生化指标的测定 | 第142页 |
| 2 结果与分析 | 第142-158页 |
| ·MSBPase 的体外扩增与克隆 | 第142-143页 |
| ·MSBPase 的序列分析 | 第143页 |
| ·MSBPase 所编码的蛋白质特性分析 | 第143-150页 |
| ·MSBPase 所编码的蛋白质结构分析 | 第143-147页 |
| ·MSBPase 所编码的蛋白质结构功能保守区和功能结构域分析 | 第147页 |
| ·疏水性分析 | 第147-148页 |
| ·跨膜区分析 | 第148-150页 |
| ·前导肽和定位分析 | 第150页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第150页 |
| ·pET30a-SBP 融合蛋白的诱导和抗体制备 | 第150-151页 |
| ·植物表达载体构建 | 第151-153页 |
| ·桑树MSBPase 基因在拟南芥中超表达及转基因拟南芥的筛选 | 第153-155页 |
| ·转基因拟南芥的PCR 鉴定 | 第153页 |
| ·转基因植株的Northern 杂交 | 第153-154页 |
| ·转基因植株的Western 杂交 | 第154-155页 |
| ·转MSBPase 基因拟南芥植株的生理生化特性分析 | 第155-158页 |
| ·转MSBPase 基因拟南芥植株的表型分析 | 第155页 |
| ·转MSBPase 基因拟南芥植株的其他特性分析 | 第155-158页 |
| 3 小结 | 第158页 |
| 4 讨论 | 第158-161页 |
| ·SBPase 对于植物生长发育的影响 | 第158-159页 |
| ·SBPase 的进化分析 | 第159-161页 |
| 第五章 桑树黄化型萎缩病病原响应蛋白-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活化酶cDNA 片段的克隆、原核表达与植物反义表达载体的构建 | 第161-172页 |
| 1 材料与方法 | 第161-164页 |
| ·材料 | 第161页 |
| ·RNA 的提取及cDNA 的合成 | 第161-162页 |
| ·RCA 中间片段的克隆 | 第162页 |
| ·RCA 3'端的克隆 | 第162-163页 |
| ·扩增产物的克隆与序列测定 | 第163页 |
| ·序列分析 | 第163页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第163页 |
| ·RCA 片段所编码的蛋白原核诱导表达与SDS-PAGE 电泳分析 | 第163-164页 |
| ·RCA 植物反义表达载体的构建与鉴定 | 第164页 |
| 2 结果与分析 | 第164-170页 |
| ·RCA 片段的体外扩增与克隆 | 第164-165页 |
| ·RCA 的序列分析 | 第165页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第165-168页 |
| ·RCA 片段编码蛋白的原核诱导表达及抗体制备 | 第168页 |
| ·RCA 植物反义表达载体的构建与鉴定 | 第168-170页 |
| 3 小结 | 第170页 |
| 4 讨论 | 第170-172页 |
| 结论 | 第172-173页 |
| 参考文献 | 第173-202页 |
| 致谢 | 第202-203页 |
| 攻读学位期间发表的主要论文 | 第203-204页 |
