中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
符号说明 | 第13-14页 |
前言 | 第14-17页 |
实验材料与方法 | 第17-57页 |
实验材料与试剂 | 第17-18页 |
实验仪器 | 第18-19页 |
实验方法 | 第19-57页 |
1.人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体的构建及表达检测 | 第19-29页 |
2.NKX3.1 siRNA真核表达载体构建及NKX3.1 siRNA稳定转染LNCaP细胞株的筛选鉴定 | 第29-34页 |
3.PCAN1基因启动子-荧光素酶报告基因质粒(pGL_3-pPCAN1)的构建及启动子活性检测 | 第34-40页 |
4.NKX3.1对PCAN1的表达调控机制的研究 | 第40-56页 |
5.细胞培养 | 第56页 |
6.统计学分析 | 第56-57页 |
实验结果 | 第57-76页 |
1.NKX3.1cDNA重组质粒pcDNA3.1-NKX3.1的酶切鉴定及测序 | 第57-59页 |
2.pcDNA3.1-NKX3.1在PC-3和LNCaP细胞中的表达效率检测 | 第59-60页 |
3.NKX3.1 siRNA重组载体的测序鉴定 | 第60-61页 |
4.NKX3.1 siRNA目的载体的筛选 | 第61-62页 |
5.NKX3.1 siRNA稳定转染LNCaP细胞株的鉴定 | 第62-63页 |
6.PCAN1启动子-荧光素酶报告基因质粒pGL_3-pPCAN1的酶切鉴定及测序 | 第63-66页 |
7.PCAN1启动子活性测定及NKX3.1,p53,Sp1,PPAR,Pten和cEBPα对PCAN1启动子活性的影响 | 第66-67页 |
8.NKX3.1对PCAN1启动子活性及mRNA表达的影响 | 第67-68页 |
9.EMSA鉴定NKX3.1蛋白与NBS1,NBS3的结合活性 | 第68-70页 |
10.ChIP鉴定NKX3.1蛋白与NBS1,NBS3的结合 | 第70-72页 |
11.双荧光素酶分析检测NKX3.1与NBSs结合活性(NBSs对SV40异源启动子活性的影响) | 第72-73页 |
12.内缺失NBS1和NBS3后对PCAN1启动子活性的影响 | 第73-76页 |
讨论 | 第76-82页 |
结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |