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FP1和HP在6-羟基多巴胺导致的腹侧中脑神经元和MES23.5细胞铁聚积中的作用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
引言第11-13页
材料和方法第13-48页
 1.腹侧中脑神经元的原代培养第13-14页
 2.免疫荧光方法鉴定腹侧中脑神经元的纯度第14-15页
 3.MES23.5多巴胺能细胞系的培养第15-17页
 4.钙黄绿素的负载及6-OHDA处理细胞铁转出功能的检测第17-18页
   ·-OHDA处理的MES23.5细胞FP1和HP蛋白水平的表达变化第18-21页
   ·-OHDA处理的VM神经元和MES23.5细胞FP1和HPmRNA的表达变化第21-24页
   ·-OHDA处理的MES23.5细胞IRPs蛋白和mRNA水平的表达变化第24-25页
 8.IRPs小干涉RNA(siRNA)表达载体的构建第25-32页
 9.FP1或HPsiRNA表达载体的构建第32-33页
 10.细胞内铁含量的测定第33页
 11.细胞内L型铁蛋白的检测第33-34页
 12.乳酸脱氢酶的释放第34-35页
 13.细胞线粒体跨膜电位的检测第35-37页
 14.细胞内活性氧物质的检测第37页
 15.FP1表达载体及FP1和HP共表达载体的构建第37-46页
 16.HP表达载体的构建第46-47页
 17.统计学处理第47-48页
结果第48-78页
 1.FP1和HP在分离培养的VM神经元和MES23.5细胞中的表达第48-51页
   ·-OHDA对VM神经元和MES23.5细胞铁转出功能的影响第51-52页
   ·-OHDA对VM神经元和MES23.5细胞FP1和HP表达的影响第52-54页
 4.枸橼酸铁胺(FAC)对FP1和HPmRNA表达的影响第54页
   ·-OHDA对铁调节蛋白(IRPs)表达的影响第54-56页
 6.IRP 1和IRP2干涉后6-OHDA对MES23.5细胞中FP1和 HP表达的影响第56-60页
 7.FP1和HP干涉后对细胞内铁聚积及功能的影响第60-67页
 8.FP1和/或HP高表达对细胞内铁聚积及功能的影响第67-78页
讨论第78-88页
 1.FP1和HP的表达降低参与了6-OHDA导致的细胞内铁聚积第78-79页
 2.FP1和HP的表达降低不是细胞内高铁的结果第79-80页
 3.IRPs参与了6-OHDA导致的FP1和HP的表达降低第80-82页
 4.FP1的表达下降造成了细胞内的铁聚积第82-84页
 5.FP1的表达下降加重了铁诱导的氧化应激第84-85页
 6.FP1和/或HP的高表达保护细胞免受氧化应激的损伤第85-86页
 7.展望第86-88页
结论第88-89页
参考文献第89-97页
综述第97-115页
附录 (缩略词表)第115-117页
攻读学位期间的研究成果第117-119页
致谢第119-120页

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