| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-7页 |
| 第一章 实验材料 | 第7-9页 |
| ·主要仪器 | 第7页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第7-8页 |
| ·重用试剂的配置方法 | 第8-9页 |
| 第二章 实验方法 | 第9-20页 |
| ·目的基因的制备 | 第9-11页 |
| ·宫颈癌细胞Hela细胞总RNA的提取 | 第9页 |
| ·引物的设计与合成 | 第9-10页 |
| ·RT-PCR扩增HSP70cDNA | 第10页 |
| ·RT-PCR扩增产物的纯化 | 第10页 |
| ·目的基因的序列测定 | 第10-11页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HSP70的构建 | 第11-13页 |
| ·目的基因及载体pAdTrack-CMV双酶切回收 | 第11-12页 |
| ·目的基因与载体连接 | 第12页 |
| ·重组质粒的转化 | 第12-13页 |
| ·重组质粒的提取 | 第13页 |
| ·重组骨架质粒的鉴定 | 第13页 |
| ·RecA+BJ5183宿主菌中构建重组子 | 第13-15页 |
| ·重组质粒的线性化与去磷酸化 | 第13-14页 |
| ·穿梭质粒与腺病毒骨架质粒的共转化 | 第14-15页 |
| ·重组子的保存与大量制备 | 第15页 |
| ·重组质粒pAd-HSP70序列测定 | 第15页 |
| ·重组腺病毒载体pAd-HSP70转染HEK293包装细胞 | 第15-16页 |
| ·重组腺病毒vAd-HSP70滴度的测定 | 第16-19页 |
| ·重组腺病毒目的基因表达的检测 | 第19-20页 |
| 第三章 实验结果 | 第20-25页 |
| ·RT-PCR检测目的基因的转录表达 | 第20页 |
| ·目的基因序列的测定 | 第20-21页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HSP70的鉴定 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌RecA+BJ5183中pAd-HSP70的构建 | 第22-23页 |
| ·重组腺病毒的包装和病毒滴度测定 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR鉴定外源基因的转录 | 第24-25页 |
| 第四章 讨论 | 第25-30页 |
| ·目的基因的获取 | 第25-26页 |
| ·载体选择 | 第26-29页 |
| ·重组腺病毒载体pAd-HSP70的构建 | 第29-30页 |
| 结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 综述 | 第33-49页 |
| 综述的参考文献 | 第45-49页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
