| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 研究背景 | 第9-19页 |
| ·转录因子与真核生物基因表达调控 | 第9-11页 |
| ·真核生物转录调控 | 第9页 |
| ·转录因子及其结构特征 | 第9-11页 |
| ·转录因子与DNA 相互作用 | 第11页 |
| ·锌指蛋白研究进展 | 第11-14页 |
| ·锌指蛋白的发现及分布 | 第11-12页 |
| ·锌指结构域的DNA 识别特异性 | 第12-14页 |
| ·C2H2 型锌指蛋白 | 第14页 |
| ·Zfp191 基因研究背景及Zfp191 蛋白的分子生物学特性 | 第14-17页 |
| ·Zfp191 基因的获得 | 第14页 |
| ·Zfp191 基因结构 | 第14-15页 |
| ·Zfp191 基因及蛋白分子的同源性分析 | 第15-16页 |
| ·Zfp191 蛋白表达谱分析 | 第16页 |
| ·Zfp191 的功能 | 第16-17页 |
| ·Zfp191 同源基因ZNF24 研究进展 | 第17页 |
| ·研究DNA 与蛋白结合性质的实验方法 | 第17-19页 |
| ·DNaseI 足迹法 | 第17-18页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第18页 |
| ·富集配体系统进化技术 | 第18页 |
| ·染色质免疫共沉淀－芯片结合技术 | 第18-19页 |
| 2 本论文研究思路 | 第19-20页 |
| 第二章 融合蛋白 GST-Zfp191BindingDomain 的构建、表达与纯化 | 第20-28页 |
| 引言 | 第20-21页 |
| 1 实验材料及方法 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·质粒和菌株来源 | 第21页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第21页 |
| ·溶液配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-23页 |
| ·重组表达载体pX-C- Zfp191BD 的构建 | 第22页 |
| ·GST-Zfp191BD 基因的表达 | 第22页 |
| ·GST-Zfp191BD 蛋白的纯化 | 第22-23页 |
| 2 实验结果 | 第23-26页 |
| ·质粒构建 | 第23页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第23-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 融合蛋白GST-Zfp191BindingDomain的DNA结合性质研究 | 第28-54页 |
| 引言 | 第28页 |
| 1 实验材料及方法 | 第28-35页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·磁性纳米粒子亲和法检测蛋白质与DNA 的相互作用 | 第30-32页 |
| ·DNA 微阵列法检测蛋白质与DNA 的相互作用 | 第32-33页 |
| ·微孔显色分析 | 第33-35页 |
| ·锌元素分析 | 第35页 |
| ·数据处理 | 第35页 |
| 2 实验结果与讨论 | 第35-51页 |
| ·鉴定GST-Zfp191BD 蛋白的DNA 结合序列 | 第35-42页 |
| ·磁性纳米粒子亲和法验证(TCAT)3 模体与GST-Zfp191BD 的结合 | 第35-40页 |
| ·DNA 微阵列验证(TCAT)3 和(TCAT)10 模体与GST-Zfp191BD 结合 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·GST-Zfp191BD 蛋白与DNA 结合的序列依赖性 | 第42-47页 |
| ·DNA微阵列考察GST-Zfp191BD与四核苷酸模体结合的序列依赖性 | 第43-45页 |
| ·微孔显色法考察GST-Zfp191BD与四核苷酸模体结合的序列依赖性 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白GST-Zfp191BD 与DNA 结合的锌离子依赖性 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白GST-Zfp191BD 与DNA 结合的热力学和动力学性质 | 第48-51页 |
| ·微孔显色法测定GST-Zfp191BD 与四核苷酸模体的结合曲线 | 第48-49页 |
| ·GST-Zfp191BD 与不同的四核苷酸模体的结合力 | 第49-50页 |
| ·GST-Zfp191BD 与不同的四核苷酸模体结合时表现的协同性 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 3 小结 | 第51-54页 |
| 第四章 研究展望 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 缩略词表 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第65-67页 |
