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草莓镶脉病毒(SVBV)启动子的克隆及活性分析

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
文献综述第12-21页
 1 启动子的概述第12页
 2 植物启动子的结构第12-14页
   ·转录起始位点第12-13页
   ·TATA-box第13页
   ·一般上游启动子元件第13-14页
     ·CAAT-box第13页
     ·GC-box第13-14页
     ·增强子和沉默子第14页
 3 植物启动子的研究进展第14-19页
   ·组成型启动子第14-15页
     ·CaMV 35S 启动子第14-15页
     ·其他启动子第15页
   ·组织或器官特异性启动子第15-18页
     ·营养器官特异性启动子第15-17页
     ·生殖器官特异性启动子第17-18页
   ·诱导型启动子第18-19页
     ·天然存在的诱导型启动子第18页
     ·人工构建的诱导型启动子第18-19页
     ·复合的诱导型启动子第19页
 4 植物病毒启动子研究概况第19-21页
引言第21-22页
材料与方法第22-31页
 1 供试材料第22页
   ·病样来源第22页
   ·植物材料第22页
   ·菌种和载体第22页
   ·酶和化学试剂第22页
   ·常用缓冲溶液和培养基第22页
   ·抗生素第22页
   ·仪器设备第22页
 2 试验方法第22-31页
   ·叶片总DNA 的提取第22-23页
   ·PCR 技术第23页
   ·PCR 产物的克隆第23-25页
     ·PCR 产物回收和纯化第23-24页
     ·PCR 产物的连接第24页
     ·感受态细胞的制备第24页
     ·连接产物的转化第24-25页
     ·阳性克隆的PCR 鉴定第25页
     ·质粒提取第25页
   ·克隆基因的测序、分析和登录第25页
   ·SVBV 启动子的克隆第25-26页
     ·启动子的引物设计第25-26页
     ·启动子的PCR 扩增第26页
   ·启动子的序列分析第26页
     ·启动子序列相似性分析第26页
     ·启动子序列结构分析第26页
   ·植物表达载体的构建第26-27页
     ·植物表达载体的构建策略第26-27页
     ·植物表达载体的构建过程第27页
   ·三亲交配第27-28页
   ·瞬时表达第28页
   ·gus 活性分析第28-29页
     ·gus 活性的组织化学分析第28页
     ·荧光光度测定第28页
     ·蛋白质含量测定第28-29页
     ·gus 荧光活性分析第29页
   ·烟草转化及卡那霉素抗性植株的再生第29-30页
   ·转基因烟草的PCR 鉴定第30-31页
结果与分析第31-39页
 1 SVBV 启动子的克隆第31页
   ·启动子的PCR 扩增第31页
   ·启动子的克隆第31页
 2 SVBV 启动子的序列分析第31-33页
   ·启动子序列相似性分析第31-32页
   ·启动子序列结构分析第32-33页
 3 植物表达载体的构建第33-35页
 4 瞬时表达中gus 活性的组织化学检测第35-36页
 5 瞬时表达中gus 荧光活性分析第36页
 6 烟草的转化和卡那抗性植株的获得第36-37页
 7 转基因烟草的PCR 检测第37-39页
讨论第39-41页
 1 SVBV启动子序列的克隆与序列分析第39-40页
 2 SVBV 启动子的活性分析第40页
 3 表达载体以根癌土壤杆菌介导转化烟草第40-41页
结论第41-42页
参考文献第42-48页
附录 A第48-53页
附录 B第53-54页
附录 C第54-56页
附录 D第56-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页
附 在读期间发表论文第58页

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