草莓镶脉病毒(SVBV)启动子的克隆及活性分析
中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
文献综述 | 第12-21页 |
1 启动子的概述 | 第12页 |
2 植物启动子的结构 | 第12-14页 |
·转录起始位点 | 第12-13页 |
·TATA-box | 第13页 |
·一般上游启动子元件 | 第13-14页 |
·CAAT-box | 第13页 |
·GC-box | 第13-14页 |
·增强子和沉默子 | 第14页 |
3 植物启动子的研究进展 | 第14-19页 |
·组成型启动子 | 第14-15页 |
·CaMV 35S 启动子 | 第14-15页 |
·其他启动子 | 第15页 |
·组织或器官特异性启动子 | 第15-18页 |
·营养器官特异性启动子 | 第15-17页 |
·生殖器官特异性启动子 | 第17-18页 |
·诱导型启动子 | 第18-19页 |
·天然存在的诱导型启动子 | 第18页 |
·人工构建的诱导型启动子 | 第18-19页 |
·复合的诱导型启动子 | 第19页 |
4 植物病毒启动子研究概况 | 第19-21页 |
引言 | 第21-22页 |
材料与方法 | 第22-31页 |
1 供试材料 | 第22页 |
·病样来源 | 第22页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌种和载体 | 第22页 |
·酶和化学试剂 | 第22页 |
·常用缓冲溶液和培养基 | 第22页 |
·抗生素 | 第22页 |
·仪器设备 | 第22页 |
2 试验方法 | 第22-31页 |
·叶片总DNA 的提取 | 第22-23页 |
·PCR 技术 | 第23页 |
·PCR 产物的克隆 | 第23-25页 |
·PCR 产物回收和纯化 | 第23-24页 |
·PCR 产物的连接 | 第24页 |
·感受态细胞的制备 | 第24页 |
·连接产物的转化 | 第24-25页 |
·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第25页 |
·质粒提取 | 第25页 |
·克隆基因的测序、分析和登录 | 第25页 |
·SVBV 启动子的克隆 | 第25-26页 |
·启动子的引物设计 | 第25-26页 |
·启动子的PCR 扩增 | 第26页 |
·启动子的序列分析 | 第26页 |
·启动子序列相似性分析 | 第26页 |
·启动子序列结构分析 | 第26页 |
·植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
·植物表达载体的构建策略 | 第26-27页 |
·植物表达载体的构建过程 | 第27页 |
·三亲交配 | 第27-28页 |
·瞬时表达 | 第28页 |
·gus 活性分析 | 第28-29页 |
·gus 活性的组织化学分析 | 第28页 |
·荧光光度测定 | 第28页 |
·蛋白质含量测定 | 第28-29页 |
·gus 荧光活性分析 | 第29页 |
·烟草转化及卡那霉素抗性植株的再生 | 第29-30页 |
·转基因烟草的PCR 鉴定 | 第30-31页 |
结果与分析 | 第31-39页 |
1 SVBV 启动子的克隆 | 第31页 |
·启动子的PCR 扩增 | 第31页 |
·启动子的克隆 | 第31页 |
2 SVBV 启动子的序列分析 | 第31-33页 |
·启动子序列相似性分析 | 第31-32页 |
·启动子序列结构分析 | 第32-33页 |
3 植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
4 瞬时表达中gus 活性的组织化学检测 | 第35-36页 |
5 瞬时表达中gus 荧光活性分析 | 第36页 |
6 烟草的转化和卡那抗性植株的获得 | 第36-37页 |
7 转基因烟草的PCR 检测 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
1 SVBV启动子序列的克隆与序列分析 | 第39-40页 |
2 SVBV 启动子的活性分析 | 第40页 |
3 表达载体以根癌土壤杆菌介导转化烟草 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录 A | 第48-53页 |
附录 B | 第53-54页 |
附录 C | 第54-56页 |
附录 D | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |
附 在读期间发表论文 | 第58页 |