摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 朱砂叶螨研究现状 | 第12-14页 |
·朱砂叶螨生态学特性 | 第12-13页 |
·防治治理 | 第13-14页 |
·日益突出的抗性问题 | 第14页 |
2 昆虫及螨类Hsp70的研究进展 | 第14-20页 |
·Hsp70的分类 | 第14-15页 |
·Hsp70的结构及生化特点 | 第15页 |
·Hsp70的生物学功能 | 第15-18页 |
·研究昆虫及螨类Hsp70的意义 | 第18-20页 |
第二章 引言 | 第20-22页 |
1 本研究拟解决的问题 | 第20页 |
2 本研究的创新点 | 第20-22页 |
第三章 朱砂叶螨Hsp70cDNA的克隆与分析 | 第22-50页 |
1 材料与方法 | 第22-33页 |
·供试朱砂叶螨 | 第22页 |
·主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
·常用储备液及培养基的配制 | 第23-24页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第24页 |
·朱砂叶螨Hsp70片段的克隆 | 第24-26页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因3′RACE扩增 | 第26-27页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因5′RACE扩增 | 第27-29页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因4条cDNA全序列扩增 | 第29-30页 |
·目的片段的克隆和测序 | 第30-32页 |
·朱砂叶螨4条Hsp70基因全长cDNA序列分析 | 第32-33页 |
2 结果与分析 | 第33-46页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第33页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因cDNA简并片段结果 | 第33-34页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因cDNA 3′RACE结果 | 第34-35页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因cDNA 5′RACE结果 | 第35-36页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因全长cDNA的获得 | 第36-37页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因全长cDNA序列分析 | 第37-42页 |
·朱砂叶螨Hsp70与其他物种Hsp70进化树及比对分析 | 第42-46页 |
·Hsp70空间结构模拟 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-50页 |
第四章 朱砂叶螨Hsp70基因mRNA的表达研究 | 第50-64页 |
1 材料与方法 | 第50-53页 |
·供试朱砂叶螨 | 第50页 |
·主要仪器和试剂 | 第50页 |
·朱砂叶螨雌成螨不同温度胁迫下死亡率观察 | 第50页 |
·引物设计 | 第50-51页 |
·朱砂叶螨无DNA污染的总RNA的获得 | 第51-52页 |
·朱砂叶螨第一链cDNA的合成 | 第52页 |
·Real-time RT-PCR条件的优化 | 第52页 |
·熔解曲线分析 | 第52-53页 |
·标准曲线的建立 | 第53页 |
·朱砂叶螨Hsp70基因mRNA定量检测 | 第53页 |
·数据分析 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-60页 |
·不同温度胁迫对朱砂叶螨雌成螨死亡率的影响 | 第53-54页 |
·朱砂叶螨经不同温度处理后无DNA污染的总RNA的获得 | 第54页 |
·标准曲线 | 第54-56页 |
·经不同温度处理后朱砂叶螨4条Hsp70基因表达量的测定 | 第56-58页 |
·不同品系朱砂叶螨4条Hsp70基因表达量的测定 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-64页 |
·朱砂叶螨Hsp70表达差异的研究方法 | 第60-61页 |
·Hsp70诱导的有效性 | 第61页 |
·朱砂叶螨Hsp70s表达与其适应温度和阿维菌素胁迫的关系 | 第61-64页 |
第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
1 朱砂叶螨4条Hsp70基因的cDNA全长序列的克隆 | 第64页 |
2 朱砂叶螨Hsp70表达差异实时定量RT-PCR检测体系的建立 | 第64页 |
3 朱砂叶螨受不同胁迫后诱导Hsp70表达量的实时定量RT-PCR检测 | 第64页 |
·朱砂叶螨受不同温度胁迫后的Hsp70表达情况检测 | 第64页 |
·朱砂叶螨不同品系Hsp70表达情况检测 | 第64页 |
4 展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录1 缩略词 | 第74-76页 |
附录2 在读期间发表的论文 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |