| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目次 | 第9-13页 |
| 1 绪论 | 第13-30页 |
| ·白介素15 | 第13-17页 |
| ·IL-15基因 | 第13-14页 |
| ·IL-15表达调控机制 | 第14-15页 |
| ·IL-15的受体及信号传导 | 第15-17页 |
| ·白介素15受体α链 | 第17-22页 |
| ·IL-15Rα基因 | 第17-18页 |
| ·IL-15Rα表达与选择剪接 | 第18页 |
| ·IL-15Rα与IL-15共分泌 | 第18-19页 |
| ·可溶性IL-15Rα受体 | 第19-20页 |
| ·IL-15Rα参与的信号转导 | 第20页 |
| ·反式递呈(Trans-presentation) | 第20-22页 |
| ·IL-15的免疫学功能 | 第22-27页 |
| ·NK细胞 | 第22-23页 |
| ·TCRα β T细胞 | 第23-24页 |
| ·NK-T细胞 | 第24-25页 |
| ·TCRγ δ肠道内上皮淋巴细胞 | 第25页 |
| ·单核细胞/巨噬细胞 | 第25页 |
| ·树突细胞 | 第25-26页 |
| ·中性粒细胞和嗜酸性粒细胞 | 第26页 |
| ·B细胞 | 第26-27页 |
| ·IL-15与免疫疾病 | 第27-28页 |
| ·类风湿性关节炎 | 第27页 |
| ·肉状瘤病 | 第27页 |
| ·炎症性肠炎与乳糜泄 | 第27-28页 |
| ·IL-15和IL-15Rα在其他动物中的研究 | 第28-30页 |
| 2 鱼类IL-15分子的研究 | 第30-56页 |
| ·鱼类IL-15的分子克隆与鉴定 | 第30-41页 |
| ·材料与方法 | 第30-37页 |
| ·实验鱼 | 第30页 |
| ·菌株 | 第30-31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·数据库及软件 | 第31页 |
| ·比较基因组学预测及分析 | 第31-32页 |
| ·总RNA提取、检测和保存 | 第32页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第32-33页 |
| ·3'RACE-PCR | 第33-34页 |
| ·5'RACE-PCR | 第34-35页 |
| ·PCR产物纯化 | 第35页 |
| ·T-A克隆 | 第35-37页 |
| ·测序鉴定和拼接 | 第37页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-41页 |
| ·IL-15全长cDNA | 第37-38页 |
| ·基因结构 | 第38-40页 |
| ·氨基酸序列 | 第40-41页 |
| ·IL-15原核表达与纯化 | 第41-47页 |
| ·材料与方法 | 第41-44页 |
| ·pET32b-IL-15表达质粒与菌株构建 | 第41-42页 |
| ·原核表达 | 第42-43页 |
| ·可溶性分析 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE | 第43页 |
| ·可溶性蛋白纯化 | 第43-44页 |
| ·透析 | 第44页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-47页 |
| ·优化诱导表达条件 | 第44-46页 |
| ·重组IL-15蛋白纯化 | 第46-47页 |
| ·IL-15组织表达规律研究 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第47页 |
| ·药物处理 | 第47页 |
| ·RT-PCR | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-48页 |
| ·IL-15进化分析 | 第48-56页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·数据收集 | 第48-49页 |
| ·比较基因组学分析 | 第49页 |
| ·多序列比对 | 第49页 |
| ·进化树构建 | 第49页 |
| ·进化树与物种树调和 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-56页 |
| 3 鱼类IL-2分子的研究 | 第56-74页 |
| ·黑青斑河豚IL-2及IL-2L的克隆、鉴定及组织分布 | 第56-64页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·基因组提取与检测 | 第56-57页 |
| ·基因组PCR | 第57页 |
| ·TOPOT-A克隆与测序 | 第57页 |
| ·基因预测 | 第57页 |
| ·IL-2与IL-2L基因克隆 | 第57-59页 |
| ·IL-2和IL-2L组织表达 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-64页 |
| ·基因组PCR、测序与基因预测 | 第59页 |
| ·基因克隆 | 第59-61页 |
| ·基因结构 | 第61-64页 |
| ·组织表达 | 第64页 |
| ·黑青斑河豚IL-2,IL-2L原核表达与纯化 | 第64-66页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·pET32b-IL-2表达质粒与菌株构建 | 第64-65页 |
| ·原核表达 | 第65页 |
| ·蛋白纯化 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-66页 |
| ·IL-2与IL-2L,IL-21进化分析 | 第66-74页 |
| ·材料与方法 | 第66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-74页 |
| 4 鱼类IL-15Rα分子的研究 | 第74-101页 |
| ·黑青斑河豚IL-15Rα的克隆 | 第74-81页 |
| ·材料与方法 | 第74-75页 |
| ·基因预测 | 第74页 |
| ·基因克隆 | 第74-75页 |
| ·基因预测与克隆 | 第75页 |
| ·基因组提取与基因组PCR | 第75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-81页 |
| ·黑青斑河豚IL-15Rα原核表达与纯化 | 第81-84页 |
| ·材料与方法 | 第81-84页 |
| ·pET41-dsIL-15Rα,pET41-ssIL-15Rα表达质粒与菌株构建 | 第81-82页 |
| ·pET28a-ssIL-15Rα构建 | 第82页 |
| ·原核表达 | 第82-83页 |
| ·可溶性蛋白纯化 | 第83页 |
| ·透析与蛋白质浓度测定 | 第83-84页 |
| ·多抗制备与纯化 | 第84-87页 |
| ·材料与方法 | 第85-86页 |
| ·抗原制备 | 第85页 |
| ·免疫过程 | 第85页 |
| ·间接ELISA法测定抗血清效价 | 第85-86页 |
| ·抗体纯化 | 第86页 |
| ·结果与讨论 | 第86-87页 |
| ·Western blot | 第87-88页 |
| ·材料与方法 | 第87-88页 |
| ·试剂 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-88页 |
| ·结果与讨论 | 第88页 |
| ·GST-pull down | 第88-90页 |
| ·材料与方法 | 第89页 |
| ·试剂 | 第89页 |
| ·方法 | 第89页 |
| ·结果与讨论 | 第89-90页 |
| ·直接夹心法ELISA | 第90-92页 |
| ·材料与方法 | 第90-91页 |
| ·试剂 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-92页 |
| ·虹鳟鱼IL-15Rα的克隆与鉴定 | 第92-101页 |
| ·材料与方法 | 第92-97页 |
| ·实验鱼 | 第93页 |
| ·基因预测与电子克隆 | 第93页 |
| ·基因克隆 | 第93-94页 |
| ·组织分布 | 第94页 |
| ·Southern blot | 第94-97页 |
| ·结果与讨论 | 第97-101页 |
| 5 脊椎动物IL-15Rα与IL-2Rα基因家族的进化研究 | 第101-114页 |
| ·材料与方法 | 第101-102页 |
| ·基因预测与共线性分析 | 第101页 |
| ·基因序列比对 | 第101页 |
| ·进化树构建 | 第101页 |
| ·相对进化速率 | 第101-102页 |
| ·基因协同进化 | 第102页 |
| ·结果与讨论 | 第102-114页 |
| 6 结论 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 作者简历 | 第126页 |
