提要 | 第1-7页 |
英文缩写词表 | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第8-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·引物的设计 | 第24页 |
·试剂 | 第24-25页 |
·质粒和菌株 | 第25页 |
·培养基 | 第25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·主要实验设备 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·提取小鼠DNA | 第26-27页 |
·重组质粒的构建 | 第27-31页 |
·PCR | 第27-28页 |
·感受态细胞的制备 | 第28页 |
·质粒DNA的提取、酶切鉴定 | 第28-31页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
·表达产物的鉴定1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶的灌注 | 第32-33页 |
·目的蛋白包含体裂解 | 第33-36页 |
·配制裂解液 | 第33页 |
·目的蛋白质的超声裂解方法 | 第33页 |
·目的蛋白质的简单裂解方法 | 第33-34页 |
·包含体洗涤方法 | 第34-35页 |
·低温过夜诱导 | 第35页 |
·包含体裂解与鉴定 | 第35-36页 |
第3章 实验结果 | 第36-44页 |
·重组小鼠IFN-β基因的构建 | 第36-37页 |
·小鼠DNA提取 | 第36页 |
·PCR | 第36页 |
·T-A连接并双酶切鉴定重组质粒 | 第36页 |
·构建表达质粒 | 第36-37页 |
·重组质粒的序列测定结果 | 第37页 |
·重组小鼠IFN-β′基因序列分析及成熟蛋白二级结构预测 | 第37-38页 |
·重组小鼠IFN-β′序列分析结果 | 第37-38页 |
·重组小鼠IFN-β′成熟蛋白二级结构预测 | 第38页 |
·重组小鼠IFN-β基因原核表达 | 第38-44页 |
·生长曲线 | 第39页 |
·诱导时间及产量 | 第39-40页 |
·诱导IPTG浓度及产量 | 第40-41页 |
·包含体裂解 | 第41-44页 |
第4章 图表 | 第44-56页 |
第5章 讨论 | 第56-62页 |
·关于信号肽 | 第56-57页 |
·小鼠IFN-β基因的原核表达 | 第57-60页 |
·温度对表达及表达产量的影响 | 第58-59页 |
·诱导时间对表达产量的影响 | 第59页 |
·IPTG浓度对表达产量的影响 | 第59-60页 |
·包含体的形成与分离和溶解 | 第60-62页 |
·包含体的形成 | 第60页 |
·包含体的分离和溶解 | 第60-62页 |
第6章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69-70页 |
中文摘要 | 第70-72页 |
Abstract | 第72-74页 |