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小鼠IFN-β的原核表达及纯化

提要第1-7页
英文缩写词表第7-8页
第1章 引言第8-24页
第2章 材料与方法第24-36页
   ·实验材料第24-26页
     ·引物的设计第24页
     ·试剂第24-25页
     ·质粒和菌株第25页
     ·培养基第25页
     ·实验动物第25页
     ·主要实验设备第25-26页
   ·实验方法第26-36页
     ·提取小鼠DNA第26-27页
     ·重组质粒的构建第27-31页
       ·PCR第27-28页
       ·感受态细胞的制备第28页
       ·质粒DNA的提取、酶切鉴定第28-31页
     ·重组蛋白的诱导表达第31-32页
     ·表达产物的鉴定1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶的灌注第32-33页
     ·目的蛋白包含体裂解第33-36页
       ·配制裂解液第33页
       ·目的蛋白质的超声裂解方法第33页
       ·目的蛋白质的简单裂解方法第33-34页
       ·包含体洗涤方法第34-35页
       ·低温过夜诱导第35页
       ·包含体裂解与鉴定第35-36页
第3章 实验结果第36-44页
   ·重组小鼠IFN-β基因的构建第36-37页
     ·小鼠DNA提取第36页
     ·PCR第36页
     ·T-A连接并双酶切鉴定重组质粒第36页
     ·构建表达质粒第36-37页
     ·重组质粒的序列测定结果第37页
   ·重组小鼠IFN-β′基因序列分析及成熟蛋白二级结构预测第37-38页
     ·重组小鼠IFN-β′序列分析结果第37-38页
     ·重组小鼠IFN-β′成熟蛋白二级结构预测第38页
   ·重组小鼠IFN-β基因原核表达第38-44页
     ·生长曲线第39页
     ·诱导时间及产量第39-40页
     ·诱导IPTG浓度及产量第40-41页
     ·包含体裂解第41-44页
第4章 图表第44-56页
第5章 讨论第56-62页
   ·关于信号肽第56-57页
   ·小鼠IFN-β基因的原核表达第57-60页
     ·温度对表达及表达产量的影响第58-59页
     ·诱导时间对表达产量的影响第59页
     ·IPTG浓度对表达产量的影响第59-60页
   ·包含体的形成与分离和溶解第60-62页
     ·包含体的形成第60页
     ·包含体的分离和溶解第60-62页
第6章 结论第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
作者简介第69-70页
中文摘要第70-72页
Abstract第72-74页

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