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宇佐美曲霉木聚糖酶基因的改造及表达

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-14页
   ·木聚糖酶概述第7-8页
     ·木聚糖概述第7页
     ·木聚糖酶概述第7-8页
   ·木聚糖酶的应用第8-9页
     ·木聚糖酶在食品、饲料、酿酒工业上的应用第8-9页
     ·木聚糖酶在造纸、纺织工业上的应用第9页
   ·木聚糖酶基因的克隆与表达现状第9页
   ·木聚糖酶热稳定性方面的研究第9-11页
     ·热稳定区、盐桥、二硫键第10页
     ·芳香族氨基酸、精氨酸、脯氨酸的含量第10-11页
     ·一些保守的氨基酸第11页
   ·木聚糖酶基因改造的方法第11-12页
     ·定点突变第11页
     ·定向进化第11-12页
     ·DNA 改组第12页
   ·课题意义第12页
   ·立题依据第12-13页
   ·课题内容第13-14页
第二章 材料与方法第14-28页
   ·材料第14-16页
     ·菌株与载体第14页
     ·工具酶、试剂和引物第14-16页
   ·方法第16-28页
     ·表达载体的构建第16-23页
     ·载体在宿主菌中的表达第23-24页
     ·大肠杆菌中表达酶粗酶液的获得及SDS-PAGE 电泳样品的制备第24页
     ·大肠杆菌中表达粗酶液酶活性的测定第24-25页
     ·重组酶在大肠杆菌中表达的SDS-PAGE 电泳第25-26页
     ·毕赤酵母中表达木聚糖酶 XynII_(S179C) 的Sephadex G-50 纯化第26页
     ·毕赤酵母中表达突变木聚糖酶 XynII_(S179C) 的SDS-PAGE第26页
     ·突变酶XynII_(S179C) 与原酶XynII 最适反应pH 值的比较第26-27页
     ·突变酶XynII_(S179C) 与原酶XynII 最适反应温度的比较第27页
     ·突变酶XynII_(S179C) 与原酶XynII 50℃热稳定性的比较第27-28页
第三章 结果与讨论第28-42页
   ·结果第28-35页
     ·表达载体的构建第28-30页
     ·载体表达的SDS-PAGE 检验及酶活性测定第30-32页
     ·毕赤酵母表达突变木聚糖酶XynII_(S179C) 的Sephadex G-50 纯化及检验第32-33页
     ·酶学性质比较第33-35页
   ·讨论第35-42页
     ·融合木聚糖酶XynIIAB 在大肠杆菌中的表达第35-36页
     ·突变木聚糖酶XynIIY65 在大肠杆菌中的表达第36-38页
     ·突变木聚糖酶XynII_(S179C) 在大肠杆菌中的表达第38-39页
     ·突变木聚糖酶XynII_(S179C) 在毕赤酵母G5115 中的表达第39-42页
第四章 结论与展望第42-43页
   ·结论第42页
   ·展望第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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