| 目录 | 第1-9页 |
| 致谢 | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-33页 |
| ·酵母磷信号调控网络 | 第17-18页 |
| ·植物磷信号调控网络 | 第18-25页 |
| ·以PHR1转录因子为中心的调控网络 | 第18-21页 |
| ·PHO2对植物磷吸收与体内平衡的调控 | 第21页 |
| ·microRNA在植物磷吸收及信号调控中的功能 | 第21-23页 |
| ·PHO1及其上游调控基因在植物磷营养转运中的功能 | 第23-24页 |
| ·其它转录因子对植物磷信号的调控 | 第24-25页 |
| ·植物缺磷条件下的生化及发育变化 | 第25-28页 |
| ·缺磷条件下植物对环境磷养分的动员与吸收 | 第25-26页 |
| ·缺磷条件下植物对体内磷元素的利用 | 第26-27页 |
| ·缺磷条件下植物根构型的适应性变化 | 第27-28页 |
| ·植物基因克隆及功能分析的反向遗传学方法 | 第28-31页 |
| ·正向遗传学和反向遗传学克隆基因 | 第28-29页 |
| ·超表达技术在植物基因功能研究中的应用 | 第29-30页 |
| ·基因沉默技术在植物基因功能研究中的应用 | 第30-31页 |
| ·插入突变体在植物基因功能研究中的应用 | 第31页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第31-33页 |
| 第二章 水稻含SPX结构域基因的表达分析 | 第33-40页 |
| ·引言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·水稻的SPX结构域基因cDNA及EST数据分析 | 第34页 |
| ·多序列比对与进化树分析 | 第34页 |
| ·水稻基因芯片 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·水稻基因组含SPX结构域基因注释及蛋白结构分析 | 第35-37页 |
| ·水稻SPX结构域基因表达分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 OsSPX1基因的功能研究 | 第40-54页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-46页 |
| ·水稻材料 | 第40页 |
| ·试验菌株和载体 | 第40-41页 |
| ·水稻培养条件 | 第41页 |
| ·植物总磷和有效磷含量的测定 | 第41-42页 |
| ·RNA的抽提和纯化 | 第42页 |
| ·半定量PCR和实时定量PCR(quantitative real-time,qRT-PCR) | 第42-43页 |
| ·Northern杂交 | 第43-44页 |
| ·超表达和RNA干涉(RNAi)载体的构建 | 第44页 |
| ·农杆菌介导的水稻转基因 | 第44-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-52页 |
| ·OsSPX1表达模式分析 | 第46-48页 |
| ·OsSPX1转基因植株的表型分析 | 第48页 |
| ·OsSPX1转基因植株中缺磷诱导表达基因的分析 | 第48-50页 |
| ·OsSPX1超表达能抑制OsPHR2的磷中毒表型 | 第50-51页 |
| ·OsSPXl超表达能抑制OsPHR2对缺磷基因的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 PSS1及其同源基因的功能研究 | 第54-63页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·水稻材料 | 第54页 |
| ·试验菌株和载体 | 第54-55页 |
| ·OsPSS1基因Promoter:GUS载体构建 | 第55页 |
| ·水稻培养条件 | 第55页 |
| ·组织GUS染色及观察 | 第55页 |
| ·DNA的小量提取 | 第55页 |
| ·TOS17突变体的鉴定 | 第55-56页 |
| ·植物有效磷含量的测定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·OsPSS1/OsPSS2/OsPSS3基因结构分析 | 第56-57页 |
| ·OsPSS1/OsPSS2/OsPSS3的表达分析 | 第57-59页 |
| ·OsPSS1/OsPSS2/OsPSS3插入突变体的鉴定 | 第59-61页 |
| ·OsPSS1/OsPSS2/OsPSS3插入突变体的表型分析 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 miR827在缺磷信号调控网络中的功能研究 | 第63-70页 |
| ·引言 | 第63-64页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·水稻材料 | 第64页 |
| ·试验菌株和载体 | 第64页 |
| ·水稻培养条件 | 第64页 |
| ·RNA的抽提,纯化和定量PCR | 第64页 |
| ·miR827超表达载体的构建 | 第64-65页 |
| ·植物有效磷含量的测定 | 第65页 |
| ·农杆菌介导的水稻转基因 | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-68页 |
| ·miR827基因结构和表达分析 | 第65-66页 |
| ·miR827超表达材料的构建 | 第66-67页 |
| ·miR827超表达材料的表型分析 | 第67页 |
| ·miR827和OsPSS1受OsPHR2调控 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第六章 OsPHO2基因克隆及其互作蛋白的功能分析 | 第70-77页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·水稻材料 | 第70-71页 |
| ·试验菌株和载体 | 第71页 |
| ·水稻培养条件 | 第71页 |
| ·TOS17突变体的鉴定 | 第71页 |
| ·RNA的抽提,纯化和定量PCR | 第71页 |
| ·植物有效磷含量的测定 | 第71页 |
| ·酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第71页 |
| ·酵母双杂交检测 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-75页 |
| ·OsPHO2基因的鉴定及功能分析 | 第72-74页 |
| ·水稻根部缺磷条件下cDNA文库的构建 | 第74页 |
| ·OsPHO2相互作用蛋白的筛选 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第七章 水稻紫色酸性磷酸酶基因家族分析 | 第77-87页 |
| ·引言 | 第77-78页 |
| ·材料与方法 | 第78-79页 |
| ·水稻材料 | 第78页 |
| ·水稻的PAP基因序列搜索与分析 | 第78页 |
| ·多序列比对与进化树分析 | 第78页 |
| ·水稻培养条件 | 第78页 |
| ·RNA的抽提,半定量和定量PCR分析 | 第78页 |
| ·植物有效磷含量的测定 | 第78页 |
| ·植物组织蛋白抽提和酸性磷酸酶活性分析 | 第78-79页 |
| ·根表面的酸性磷酸酶活性分析 | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-85页 |
| ·水稻PAP基因注释,蛋白结构及进化分析 | 第79-81页 |
| ·OsPAP基因对缺磷条件的响应 | 第81-82页 |
| ·缺磷诱导表达的PAP基因受到OsPHR2的调控 | 第82-84页 |
| ·OsPHR2-Oe,pho2和SPX1-Ri植株根部酸性磷酸酶活性提高 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 第八章 结论与展望 | 第87-91页 |
| ·结论 | 第87-89页 |
| ·OsSPX1反馈抑制水稻缺磷信号 | 第87-88页 |
| ·OsPHR2,miR827与OsPSS1组成了缺磷信号调控支路 | 第88-89页 |
| ·OsPHO2相互作用蛋白的研究 | 第89页 |
| ·多个酸性磷酸酶基因受缺磷信号调控 | 第89页 |
| ·展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 附件Ⅰ | 第101-103页 |
| 附件Ⅱ | 第103-106页 |
| 附件Ⅲ | 第106页 |
