| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-26页 |
| 1 先天性脊柱侧凸概要 | 第10-12页 |
| 2 先天性脊柱侧凸病因学 | 第12-15页 |
| 2.1 环境因素 | 第12-13页 |
| 2.2 遗传因素 | 第13-14页 |
| 2.3 环境因素与遗传因素相互作用 | 第14-15页 |
| 3 体节形成及其分子生物学机制 | 第15-17页 |
| 3.1 体节形成（somitogenesis） | 第15页 |
| 3.2 分子生物学与信号通路 | 第15-17页 |
| 4 PCP通路基因突变是先天性脊柱侧凸的重要遗传学病因 | 第17-22页 |
| 4.1 细胞极性（cell polarity） | 第17-18页 |
| 4.2 PCP信号通路（Planar Cell Polarity pathway） | 第18-22页 |
| 4.2.1 核心PCP基因 | 第19-20页 |
| 4.2.2 PCP信号通路与先天性脊柱侧凸 | 第20-21页 |
| 4.2.3 VANGL1和VANGL2 | 第21-22页 |
| 5 全外显子测序(Whole Exome Sequencing)技术 | 第22-23页 |
| 6 实验设计思路、目标及路线图 | 第23-26页 |
| 6.1 设计思路与目标 | 第23-24页 |
| 6.2 路线图 | 第24-26页 |
| 第一部分 PCP通路基因突变对先天性脊柱侧凸的致病性评估 | 第26-78页 |
| 1.1 材料与方法 | 第26-38页 |
| 1.1.1 主要实验设备 | 第26-27页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 1.1.3 实验对象 | 第27-28页 |
| 1.1.4 资料收集及样本采集 | 第28-29页 |
| 1.1.5 外周血全基因组DNA提取 | 第29-30页 |
| 1.1.6 全外显子测序 | 第30-32页 |
| 1.1.7 PCP信号通路基因整理 | 第32页 |
| 1.1.8 突变致病性评估 | 第32-34页 |
| 1.1.9 PCP通路基因筛选及多基因模型建立 | 第34页 |
| 1.1.10 PCR及Sanger测序验证突变位点 | 第34-38页 |
| 1.2 结果与分析 | 第38-73页 |
| 1.2.1 队列研究对象基本信息 | 第38-39页 |
| 1.2.2 全外显子测序数据质量分析 | 第39-40页 |
| 1.2.3 VANGL1和VANGL2基因全外显子数据分析 | 第40-52页 |
| 1.2.4 VANGL基因突变患者临床表型及影像学资料 | 第52-62页 |
| 1.2.5 PCP信号通路多基因模型 | 第62页 |
| 1.2.6 VANGL及RO2突变位点验证 | 第62-69页 |
| 1.2.7 突变位点致病性汇总 | 第69-73页 |
| 1.3 讨论 | 第73-77页 |
| 1.3.1 VANGL1和VANGL2单基因致病模式 | 第74-76页 |
| 1.3.2 PCP信号通路双基因、多基因致病模式 | 第76-77页 |
| 1.4 结论 | 第77-78页 |
| 第二部分 VANGL1和VANGL2基因突变与先天性脊柱侧凸临床表型的关联研究 | 第78-90页 |
| 2.1 材料与方法 | 第78-79页 |
| 2.1.1 入组病例资料整理 | 第78页 |
| 2.1.2 实验组和对照组 | 第78页 |
| 2.1.3 年龄、性别 | 第78页 |
| 2.1.4 椎体畸形 | 第78-79页 |
| 2.1.5 肋骨畸形 | 第79页 |
| 2.1.6 先天性脊柱侧凸合并其他畸形 | 第79页 |
| 2.1.7 统计分析 | 第79页 |
| 2.2 结果与分析 | 第79-87页 |
| 2.2.1 性别分布 | 第79-80页 |
| 2.2.2 年龄分布 | 第80页 |
| 2.2.3 椎体畸形 | 第80-84页 |
| 2.2.4 肋骨畸形 | 第84-85页 |
| 2.2.5 神经管畸形 | 第85-86页 |
| 2.2.6 先天性心脏病 | 第86-87页 |
| 2.3 讨论 | 第87-88页 |
| 2.4 结论 | 第88-90页 |
| 第三部分 VANGL1和VANGL2突变位点体外功能实验 | 第90-112页 |
| 3.1 材料与方法 | 第90-102页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第90页 |
| 3.1.2 主要实验设备 | 第90-91页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第91-92页 |
| 3.1.4 质粒构建 | 第92-99页 |
| 3.1.5 细胞培养、传代与转染 | 第99-100页 |
| 3.1.6 VANGL野生型与突变型蛋白印记实验(Western blot) | 第100-102页 |
| 3.1.7 VANGL1突变蛋白降解抑制实验 | 第102页 |
| 3.2 结果与分析 | 第102-108页 |
| 3.2.1 pEGFP-C1-VANGL1/2真核表达质粒构建 | 第102-103页 |
| 3.2.2 HEK293T细胞转染 | 第103-105页 |
| 3.2.3 VANGL1/2野生型和突变型蛋白表达量 | 第105-107页 |
| 3.2.4 VANGL1 Glu281Gly和Arg443Trp突变蛋白稳定性 | 第107-108页 |
| 3.3 讨论 | 第108-110页 |
| 3.4 结论 | 第110-112页 |
| 展望 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-128页 |
| 综述 | 第128-148页 |
| 参考文献 | 第140-148页 |
| 附录 | 第148-152页 |
| 缩略词表 | 第148-150页 |
| 氨基酸简写表 | 第150-152页 |
| 致谢 | 第152-154页 |
