摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第11-18页 |
1.1 miRNA的研究 | 第11-14页 |
1.1.1 miRNA的发现 | 第11页 |
1.1.2 家蚕miRNA的研究进展 | 第11-12页 |
1.1.3 miRNA的合成 | 第12页 |
1.1.4 miRNA的作用机制 | 第12-14页 |
1.2 自噬的研究 | 第14-17页 |
1.2.1 细胞自噬概述 | 第14-15页 |
1.2.2 细胞自噬调控机制 | 第15-16页 |
1.2.3 家蚕细胞自噬研究现状 | 第16-17页 |
1.3 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-35页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 主要实验仪器 | 第18-19页 |
2.3 主要实验试剂及溶液配制 | 第19-21页 |
2.3.1 主要实验试剂 | 第19-20页 |
2.3.2 常用溶液配制 | 第20-21页 |
2.4 主要实验方法 | 第21-35页 |
2.4.1 载体构建方法 | 第21-27页 |
2.4.2 双荧光素酶报告基因体系检测方法 | 第27-30页 |
2.4.3 细胞瞬时过表达荧光载体的检测 | 第30-33页 |
2.4.4 个体注射过表达或抑制miRNA | 第33-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-54页 |
3.1 双荧光素酶报告基因体系检测 | 第35-42页 |
3.1.1 Atg1/pMD19-T载体构建 | 第35-38页 |
3.1.2 Atg1/psiCHECK2载体构建 | 第38-41页 |
3.1.3 双荧光素酶活性检测 | 第41-42页 |
3.2 细胞瞬时过表达荧光载体的检测 | 第42-50页 |
3.2.1 20E诱导自噬发生 | 第42-44页 |
3.2.2 Bmo-miR-34转染BmN细胞时间优化 | 第44-45页 |
3.2.3 Bmo-miR-34转染BmN细胞实验 | 第45-48页 |
3.2.4 ATG8在BmN细胞中的表达 | 第48-50页 |
3.3 个体实验 | 第50-54页 |
第四章 结论与讨论 | 第54-59页 |
4.1 结论 | 第54-55页 |
4.1.1 Bmo-miR-34通过与靶基因的互作抑制报告基因荧光素酶活性 | 第54页 |
4.1.2 Bmo-miR-34影响20E诱导的BmN细胞自噬的发生 | 第54页 |
4.1.3 Bmo-miR-34的过表达或抑制影响脂肪体自噬发生 | 第54-55页 |
4.2 讨论 | 第55-57页 |
4.3 研究展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-69页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |