| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第14-19页 |
| 第二章 实验材料与设备 | 第19-23页 |
| 2.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.2 饲养环境 | 第19页 |
| 2.3 细胞系 | 第19页 |
| 2.4 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.5 主要实验设备 | 第21页 |
| 2.6 实验药品制备 | 第21-23页 |
| 第三章 实验方法 | 第23-35页 |
| 3.1 糖尿病模型和氧诱导视网膜病变模型的建立 | 第23-24页 |
| 3.1.1 大鼠糖尿病模型的建立 | 第23页 |
| 3.1.2 监测指标 | 第23页 |
| 3.1.3 视网膜铺片观察视网膜血管渗漏 | 第23-24页 |
| 3.1.4 视网膜铺片染色观察周细胞数量 | 第24页 |
| 3.2 细胞的培养与处理 | 第24-25页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 3.2.2 细胞复苏 | 第25页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第25页 |
| 3.2.4 实验处理 | 第25页 |
| 3.3 CCK-8试剂盒检测细胞活力 | 第25-26页 |
| 3.4 Edu试剂盒检测细胞增殖 | 第26页 |
| 3.5 血管生成实验 | 第26页 |
| 3.6 TUNEL染色 | 第26-27页 |
| 3.7 G6PD活性测定 | 第27页 |
| 3.8 NADPH/NADP测定 | 第27页 |
| 3.9 乳酸含量测试 | 第27-28页 |
| 3.10 ROS检测 | 第28页 |
| 3.11 GSH/GSSG检测 | 第28-29页 |
| 3.12 western blot | 第29-31页 |
| 3.12.1 细胞总蛋白的提取 | 第29页 |
| 3.12.2 蛋白质定量(BCA法) | 第29-30页 |
| 3.12.3 电泳 | 第30页 |
| 3.12.4 转膜 | 第30页 |
| 3.12.5 封闭 | 第30页 |
| 3.12.6 抗原抗体杂交反应 | 第30页 |
| 3.12.7 显色反应(ECL发光法) | 第30-31页 |
| 3.13 Real-Time PCR | 第31-34页 |
| 3.13.1. RNA提取 | 第31-32页 |
| 3.13.2 反转录 | 第32-33页 |
| 3.13.3 PCR扩增 | 第33-34页 |
| 3.14 统计分析 | 第34-35页 |
| 第四章 实验结果 | 第35-54页 |
| 1. 大鼠糖尿病视网膜G6PD的mRNA水平表达下降 | 第35-38页 |
| 2. CoCl_2模拟缺氧诱导内皮细胞损伤 | 第38-41页 |
| 3. 缺氧诱导内皮细胞G6PD的蛋白表达和活性显著下降 | 第41-42页 |
| 4. 抑制G6PD直接损伤内皮细胞 | 第42-45页 |
| 5. NAC改善缺氧下G6PD活性的减少,但对缺氧下G6PD的蛋白表达没有影响 | 第45-46页 |
| 6. NAC显著改善缺氧诱导的内皮细胞损伤 | 第46-49页 |
| 7. NAC通过G6PD介导改善缺氧刺激下内皮细胞的损伤 | 第49-54页 |
| 第五章 讨论 | 第54-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-62页 |
| 英文缩略词表 | 第62-63页 |
| 引用文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
