| 符号说明 | 第6-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 综述1:细胞因子转录后调控的作用方式及其生物学意义 | 第16-23页 |
| 1.1 细胞因子转录后调控机制 | 第17-21页 |
| 1.1.1 “AUUUA”序列与RNA结合蛋白依赖性的转录后调控机制 | 第17页 |
| 1.1.2 miRNA介导的细胞因子转录后调控 | 第17-19页 |
| 1.1.3 RNA颗粒介导的转录后调控机制 | 第19-21页 |
| 1.2 TNF-α转录后调控机制 | 第21-22页 |
| 1.3 细胞因子转录后调控生物学意义 | 第22-23页 |
| 第一章 综述2:钠钾ATP酶及其配体的信号转导和免疫调节功能研究 | 第23-27页 |
| 2.1 钠钾ATP酶及其天然配体简介 | 第23页 |
| 2.2 钠钾ATP酶及其天然配体的信号转导功能 | 第23-25页 |
| 2.2.1 Ca~(2+)在强心苷信号转导过程中的作用 | 第24页 |
| 2.2.2 钠钾ATP酶通过蛋白质相互作用介导强心苷信号转导过程 | 第24-25页 |
| 2.3 钠钾ATP酶及其天然配体参与免疫调节 | 第25-27页 |
| 第一章 综述3:基于细胞因子的脓毒症及其免疫麻痹治疗研究 | 第27-30页 |
| 3.1 脓毒症与全身性炎症反应 | 第27页 |
| 3.2 免疫麻痹的提出 | 第27页 |
| 3.3 促/抗炎细胞因子在脓毒症中的作用 | 第27-28页 |
| 3.4 基于细胞因子的脓毒症免疫麻痹治疗策略与存在的问题 | 第28-30页 |
| 第二章 钠钾ATP酶抑制剂哇巴因逆转脓毒症免疫麻痹 | 第30-55页 |
| 前言 | 第30页 |
| 材料与方法 | 第30-42页 |
| 1 实验材料 | 第30-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-42页 |
| 结果1:Ouabain逆转免疫麻痹 | 第42-46页 |
| 1.1 免疫麻痹小鼠模型的建立 | 第42-44页 |
| 1.2 Ouabain提高免疫麻痹小鼠的存活率、细菌清除率以及脾脏中CD~(4+)和CD~(8+)T细胞的比例 | 第44-45页 |
| 1.3 Ouabain上调脓毒症病人单核细胞HLA-DR的表达 | 第45-46页 |
| 结果2:Ouabain逆转免疫麻痹依赖TNF-α | 第46-49页 |
| 2.1 Infliximab抑制ouabain逆转麻痹作用 | 第46-47页 |
| 2.2 Ouabain对正常与脓毒症病人单核细胞表达TNF-α的差异 | 第47-48页 |
| 2.3 Ouabain逆转内毒素耐受 | 第48-49页 |
| 结果3:Ouabain和LPS激活多种免疫细胞与非免疫细胞TNF-α表达的差异 | 第49-52页 |
| 3.1 Ouabain与LPS对多种细胞TNF-α表达差异 | 第49-50页 |
| 3.2 NF-κB通路介导TNF-α转录 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 miR-181转录后调控TNF-α的生物学机制与病理生理功能 | 第55-84页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 材料与方法 | 第56-66页 |
| 1 实验材料 | 第56-57页 |
| 2 试验方法 | 第57-66页 |
| 结果1:miR-181介导TNF-α mRNA降解 | 第66-71页 |
| 1.1 预测作用于TNF-α mRNA的miRNAs | 第66页 |
| 1.2 miR-181下调哇巴因和LPS激发的TNF-α mRNA表达 | 第66-67页 |
| 1.3 miR-181直接结合TNF-α 3'UTR | 第67-68页 |
| 1.4 miR-181d促进TNF-α mRNA降解,不影响TNF-α mRNA翻译 | 第68-71页 |
| 结果2:miR-181抑制TNBS诱导的小鼠结肠炎 | 第71-74页 |
| 2.1 特殊修饰的miR-181d (agomir-181d)药物体内分布 | 第71页 |
| 2.2 验证agomir-181d药物体内功能 | 第71-72页 |
| 2.3 Agomir-181d药物缓解TNBS诱导的小鼠结肠炎 | 第72-74页 |
| 结果3:miR-181促进脓毒症免疫麻痹 | 第74-77页 |
| 3.1 Agomir-181d药物促进免疫麻痹 | 第74-75页 |
| 3.2 Antagomir-181部分逆转细胞内毒素耐受 | 第75-76页 |
| 3.3 脓毒症病人单核细胞中miR-181s与TNF-α mRNA的表达存在负相关性 | 第76-77页 |
| 结果4:EGR1介导human miR-181c/d转录激活 | 第77-81页 |
| 4.1 Ouabain和LPS刺激内源miR-181s表达 | 第77页 |
| 4.2 Human miR-181家族染色体定位 | 第77-78页 |
| 4.3 Ouabain和LPS依赖于转录因子EGR1促进miR-181c/d的表达 | 第78-81页 |
| 4.4 EGR1通过miR-181c/d促进TNF-α mRNA降解 | 第81页 |
| 结论 | 第81页 |
| 讨论 | 第81-84页 |
| 第四章 HuR稳定TNF-α mRNA的生物学机制与病理生理功能 | 第84-104页 |
| 前言 | 第84页 |
| 材料与方法 | 第84-91页 |
| 1 实验材料 | 第84-86页 |
| 2 试验方法 | 第86-91页 |
| 结果1:HuR增强TNF-α mRNA稳定性 | 第91-94页 |
| 1.1 Ouabain抑制TNF-α mRNA快速降解 | 第91页 |
| 1.2 HuR介导TNF-α mRNA稳定性 | 第91-93页 |
| 1.3 HuR结合TNF-α mRNA 3'UTR起到稳定作用 | 第93-94页 |
| 结果2:HuR具有促急性炎症作用 | 第94-96页 |
| 2.1 体内knock-down HuR抑制急性肺损伤 | 第94-96页 |
| 结果3:体内knock-down HuR促进脓毒症免疫麻痹 | 第96-97页 |
| 结果4:HuR与miR-181竞争结合TNF-α 3'UTR | 第97-102页 |
| 4.1 HuR与miR-181结合位点距离与功能的关系 | 第97-99页 |
| 4.2 Ouabain诱导HuR出核与miR-181竞争结合TNF-α mRNA | 第99-100页 |
| 4.3 HuR与miR-181竞争并将一部分TNF-α mRNA招募到压力颗粒(SGs)中 | 第100-102页 |
| 结论 | 第102页 |
| 讨论 | 第102-104页 |
| 第五章 哇巴因诱导HuR蛋白出核及其信号通路初步研究 | 第104-114页 |
| 前言 | 第104页 |
| 材料与方法 | 第104-107页 |
| 1 实验材料 | 第104-105页 |
| 2 试验方法 | 第105-107页 |
| 结果:Ouabain诱导HuR蛋白磷酸化修饰与出核 | 第107-112页 |
| 1 构建HuR蛋白功能域缺失和氨基酸点突变克隆 | 第107-108页 |
| 2 Ouabain诱导内源HuR蛋白出核进入细胞质 | 第108-109页 |
| 3 HR区影响HuR蛋白核质穿梭功能 | 第109-110页 |
| 4 磷酸化影响ouabain介导的HuR蛋白出核 | 第110-111页 |
| 5 PKC α和CHK2通路参与哇巴因诱导HuR蛋白出核进入细胞质 | 第111-112页 |
| 结论 | 第112页 |
| 讨论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-132页 |
| 全文总结 | 第132-134页 |
| 附录: 博士期间已发表或待发表论文: | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-137页 |
