| 主要缩略词 | 第9-12页 |
| 摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 第一章 背景介绍 | 第18-28页 |
| 1.1 神经退行性疾病 | 第18-19页 |
| 1.2 帕金森病 | 第19-20页 |
| 1.3 路易体 | 第20页 |
| 1.4 α-突触核蛋白 | 第20-23页 |
| 1.5 α-Syn的翻译后修饰 | 第23-25页 |
| 1.6 神经炎症与PD | 第25-26页 |
| 1.7 PD与金属离子 | 第26-28页 |
| 第二章 α-Syn1-121片段的聚集性及毒性相关研究 | 第28-75页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 材料及仪器 | 第28-34页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 试剂及耗材 | 第29-33页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-50页 |
| 2.3.1 α-Syn121片段质粒构建 | 第34-36页 |
| 2.3.2 α-Syn121的表达纯化 | 第36-37页 |
| 2.3.3 固相合成α-SynC-19肽 | 第37-38页 |
| 2.3.4 聚集样品制备 | 第38页 |
| 2.3.5 硫黄素T荧光实验 | 第38-39页 |
| 2.3.6 透射电子显微镜实验 | 第39页 |
| 2.3.7 动态光散射实验 | 第39页 |
| 2.3.8 浊度实验 | 第39-40页 |
| 2.3.9 上清蛋白浓度检测实验 | 第40页 |
| 2.3.10 傅里叶变换红外光谱 | 第40-41页 |
| 2.3.11 点杂交实验 | 第41页 |
| 2.3.12 圆二色光谱 | 第41-42页 |
| 2.3.13 细胞培养及稳转细胞株构建 | 第42-43页 |
| 2.3.14 MTT细胞毒性实验 | 第43-44页 |
| 2.3.15 台盼蓝实验 | 第44-45页 |
| 2.3.16 染料泄漏实验 | 第45页 |
| 2.3.17 红细胞溶血实验 | 第45-46页 |
| 2.3.18 活性氧检测 | 第46-47页 |
| 2.3.19 蛋白质免疫印迹实验 | 第47-48页 |
| 2.3.20 末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测凋亡 | 第48页 |
| 2.3.21 免疫荧光 | 第48-49页 |
| 2.3.22 统计学分析 | 第49-50页 |
| 2.4 实验结果 | 第50-72页 |
| 2.4.1 α-Syn全长及α-Syn121蛋白的表达纯化 | 第50-51页 |
| 2.4.2 α-Syn121聚集速度较全长更快 | 第51-55页 |
| 2.4.3 α-Syn121较全长更早出现大颗粒聚集物 | 第55-57页 |
| 2.4.4 α-Syn121较全长更早出现结构转变 | 第57-59页 |
| 2.4.5 α-Syn121的细胞毒性较全长增强 | 第59页 |
| 2.4.6 α-Syn121的破膜能力较全长减弱 | 第59-60页 |
| 2.4.7 α-Syn121形成富含无规则卷曲结构的聚集物,其细胞毒性更强 | 第60-62页 |
| 2.4.8 α-Syn121刺激细胞产生ROS,激活细胞内凋亡通路 | 第62-67页 |
| 2.4.9 过表α-Syn121的细胞生长速度减缓,ROS及凋亡水平升高 | 第67-68页 |
| 2.4.10α-Syn121聚集物可激活细胞内Caspase-1,剪切α-Syn生成更多α-Syn121 | 第68-69页 |
| 2.4.11 α-Syn121聚集物可促进细胞内形成泛素化且S129位磷酸化的α-Syn沉积 | 第69-72页 |
| 2.5 讨论与总结 | 第72-75页 |
| 第三章 α-Syn病理突变体及相应121截短蛋白聚集性与毒性及其对与铜离子催化ROS产生影响的研究 | 第75-97页 |
| 3.1 前言 | 第75-77页 |
| 3.2 材料及仪器 | 第77-79页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第77页 |
| 3.2.2 试剂及耗材 | 第77-79页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第79页 |
| 3.3 实验方法 | 第79-83页 |
| 3.3.1 表达α-Syn病理突变体全长及121截短的质粒构建 | 第79-80页 |
| 3.3.2 α-Syn病理突变体全长及121截短蛋白的表达纯化 | 第80页 |
| 3.3.3 硫黄素T荧光实验 | 第80页 |
| 3.3.4 透射电子显微镜 | 第80页 |
| 3.3.5 染料泄漏实验 | 第80-81页 |
| 3.3.6 红细胞溶血实验 | 第81页 |
| 3.3.7 MTT细胞毒性实验 | 第81页 |
| 3.3.8 铜离子消耗抗坏血酸盐实验 | 第81页 |
| 3.3.9 香豆素-3-羧酸氧化实验 | 第81-82页 |
| 3.3.10 Amplex红氧化实验 | 第82页 |
| 3.3.11 统计学分析 | 第82-83页 |
| 3.4 实验结果 | 第83-95页 |
| 3.4.1 α-Syn病理突变体全长及相应121截短蛋白的表达纯化 | 第83-84页 |
| 3.4.2 α-Syn病理突变体121截短蛋白聚集速度较全长更快 | 第84-87页 |
| 3.4.3 α-Syn病理突变体121截短蛋白膜毒性较全长减弱 | 第87-90页 |
| 3.4.4 α-Syn病理突变体121截短蛋白细胞毒性较全长增强 | 第90-91页 |
| 3.4.5 α-Syn病理突变体121截短蛋白抑制铜离子形成ROS的能力较全长减弱 | 第91-95页 |
| 3.5 讨论与总结 | 第95-97页 |
| 第四章 总结与展望 | 第97-101页 |
| 4.1 总结 | 第97-99页 |
| 4.2 展望 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 综述 | 第113-142页 |
| 参考文献 | 第127-142页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
