中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-20页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 文献综述 | 第13-20页 |
第2章 人胎盘源间充质干细胞的分离、培养及鉴定 | 第20-28页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验仪器和试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 实验试剂的配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 HPMSCs的原代培养 | 第22-23页 |
2.2.2 HPMSCs传代培养 | 第23页 |
2.2.3 HPMSCs冻存 | 第23页 |
2.2.4 HPMSCs复苏 | 第23-24页 |
2.2.5 HPMSCs成骨诱导分化 | 第24页 |
2.2.6 HPMSCs成脂诱导分化 | 第24-25页 |
2.3 结果 | 第25-26页 |
2.3.1 HPMSCs的形态及生长状况 | 第25页 |
2.3.2 HPMSCs的成骨诱导分化检测 | 第25-26页 |
2.3.3 HPMSCs的成脂诱导分化检测 | 第26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
第3章 腺病毒和慢病毒载体感染HPMSCS的比较及HPMSCS-LMP1稳转株筛选 | 第28-48页 |
3.1 实验材料 | 第28-30页 |
3.1.1 实验仪器和试剂 | 第28-29页 |
3.1.2 实验试剂的配制 | 第29-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-39页 |
3.2.1 载体构建 | 第30-34页 |
3.2.2 慢病毒和腺病毒载体感染HPMSCs的比较 | 第34页 |
3.2.3 HPMSCs-LMP1稳转株筛选 | 第34-39页 |
3.3 结果 | 第39-47页 |
3.3.1 酶切检验 | 第39-40页 |
3.3.2 测序结果 | 第40-44页 |
3.3.3 病毒载体感染HPMSCs后GFP表达情况 | 第44页 |
3.3.4 LMP-1重组慢病毒载体感染HEK293细胞后荧光图 | 第44-45页 |
3.3.5 构建的稳定细胞株荧光显微镜观察结果 | 第45-46页 |
3.3.6 LMP-1基因表达水平检测 | 第46页 |
3.3.7 WesternBlot检测LMP-1蛋白表达 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-48页 |
第4章 LMP-1重组慢病毒感染HPMSCS的定向分化 | 第48-55页 |
4.1 实验材料 | 第48页 |
4.1.1 实验仪器和试剂 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-50页 |
4.2.1 CCK-8测定细胞生长曲线 | 第48页 |
4.2.2 成骨诱导分化 | 第48-49页 |
4.2.3 qPCR检测 | 第49页 |
4.2.4 WesternBlotting | 第49-50页 |
4.3 实验结果 | 第50-53页 |
4.3.1 LMP-1慢病毒感染后HPMSCs的增殖活性变化 | 第50页 |
4.3.2 LMP-1慢病毒感染HPMSCs后的成骨分化 | 第50-53页 |
4.4 讨论 | 第53-55页 |
第5章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
作者简介及在校期间取得的科研成果 | 第63-65页 |
致谢 | 第65页 |