| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 生物节律的概述 | 第11页 |
| 1.2 生物钟蛋白隐花色素的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 生物钟蛋白隐花色素参与生物节律的调节 | 第11-13页 |
| 1.2.2 生物钟蛋白Cry参与免疫调节 | 第13页 |
| 1.2.3 生物钟蛋白Cry参与生物指针定向研究 | 第13-14页 |
| 1.3 磁受体蛋白IscA的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 磁受体蛋白IscA参与铁硫簇的合成及其调控氧化应激反应 | 第14-15页 |
| 1.3.2 磁受体蛋白IscA参与的生物节律的研究 | 第15页 |
| 1.4 中华绒螯蟹的生物学特征及养殖现状 | 第15页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 实验动物与菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 引物信息 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 中华绒螯蟹免疫刺激及样品采集 | 第22页 |
| 2.2.2 中华绒螯蟹光暗刺激及样品采集 | 第22页 |
| 2.2.3 中华绒螯蟹血淋巴细胞的原代培养及H2O2刺激 | 第22-23页 |
| 2.2.4 中华绒螯蟹各个组织总RNA的提取及cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第24页 |
| 2.2.6 基因克隆及序列分析 | 第24-27页 |
| 2.2.7 重组蛋白的原核表达及纯化 | 第27-29页 |
| 2.2.8 多克隆抗体的制备及WesternBlot检测 | 第29页 |
| 2.2.9 免疫组织化学实验 | 第29页 |
| 2.2.10 EsCry基因干扰实验 | 第29-30页 |
| 2.2.11 EsIscA2蛋白的铁结合实验 | 第30页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-47页 |
| 3.1 EsCry对中华绒螯蟹生物钟的调控 | 第31-37页 |
| 3.1.1 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry的序列与结构特征 | 第31-35页 |
| 3.1.2 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry在脑中的节律表达 | 第35页 |
| 3.1.3 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry的组织分布 | 第35-36页 |
| 3.1.4 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry的蛋白重组及WesternBlot验证 | 第36页 |
| 3.1.5 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 3.2 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry参与的免疫调节 | 第37-39页 |
| 3.2.1 嗜水气单胞菌A.hydrophila和脂多糖LPS刺激后生物钟蛋白EsCry的表达 | 第37-38页 |
| 3.2.2 中华绒螯蟹生物钟蛋白EsCry的干扰效应及干扰后EsLITAF和EsILF的表达 | 第38-39页 |
| 3.3 中华绒螯蟹EsIscA2对免疫应答的调控 | 第39-47页 |
| 3.3.1 中华绒螯蟹EsIscA2的序列与结构特征 | 第39-41页 |
| 3.3.2 中华绒螯蟹EsIscA2的铁结合实验 | 第41-42页 |
| 3.3.3 中华绒螯蟹EsIscA2的组织分布 | 第42页 |
| 3.3.4 中华绒螯蟹EsIscA2的蛋白重组及WesternBlot验证 | 第42-43页 |
| 3.3.5 中华绒螯蟹EsIscA2的亚细胞定位 | 第43页 |
| 3.3.6 嗜水气单胞菌A.hydrophila和脂多糖LPS刺激后的EsIscA2表达 | 第43-44页 |
| 3.3.7 中华绒螯蟹原代血细胞H2O2刺激后EsIscA2的表达 | 第44-45页 |
| 3.3.8 中华绒螯蟹免疫刺激后EsGrx2的表达 | 第45-47页 |
| 4 分析与讨论 | 第47-53页 |
| 4.1 中华绒螯蟹EsCry的基本分子特征 | 第47-48页 |
| 4.2 中华绒螯蟹EsCry参与调控免疫应答 | 第48-49页 |
| 4.3 中华绒螯蟹EsIscA2的基本分子特征 | 第49-50页 |
| 4.4 中华绒螯蟹EsIscA2参与调控免疫应答 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
