| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7页 |
| 一、前言 | 第8-13页 |
| 1.1 基孔肯雅病毒 | 第8页 |
| 1.2 非结构蛋白 | 第8-9页 |
| 1.3 脂肪酸合成酶 | 第9-10页 |
| 1.4 脂肪酸合成酶抑制剂 | 第10-11页 |
| 1.5 棕榈酰化 | 第11-12页 |
| 1.6 论文研究概述 | 第12-13页 |
| 二、材料与方法 | 第13-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-17页 |
| 2.1.1 细胞培养及相关试剂药品 | 第13页 |
| 2.1.2 抗体 | 第13页 |
| 2.1.3 病毒 | 第13页 |
| 2.1.4 抑制剂 | 第13-14页 |
| 2.1.5 质粒 | 第14页 |
| 2.1.6 缓冲液配方 | 第14-16页 |
| 2.1.7 试剂盒 | 第16-17页 |
| 2.1.8 生化试剂 | 第17页 |
| 2.1.9 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-34页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第17-19页 |
| 2.2.2 基孔肯雅病毒疫苗株制备 | 第19-21页 |
| 2.2.3 构建质粒 | 第21-24页 |
| 2.2.4 免疫共沉淀 | 第24-25页 |
| 2.2.5 免疫印迹 | 第25-26页 |
| 2.2.6 免疫荧光 | 第26-27页 |
| 2.2.7 qPCR | 第27-29页 |
| 2.2.8 RNA干扰 | 第29页 |
| 2.2.9 ABE实验 | 第29-32页 |
| 2.2.10 空斑计数实验 | 第32-34页 |
| 三、实验结果 | 第34-52页 |
| 3.1 基孔肯雅病毒的制备 | 第34-35页 |
| 3.2 nsP1棕榈酰化的关键位点是417-419位的半胱氨酸 | 第35-38页 |
| 3.3 nsP1 417-419位半胱氨酸的缺失抑制病毒复制 | 第38-39页 |
| 3.4 脂肪酸合成酶抑制剂降低nsP1的棕榈酰化水平和细胞表面定位 | 第39-40页 |
| 3.5 病毒侵染会改变脂肪酸合成酶在细胞内的量 | 第40-41页 |
| 3.6 脂肪酸合成酶抑制剂抑制病毒复制 | 第41-43页 |
| 3.7 棕榈酸能拯救脂肪酸合成酶抑制剂以及2-BP对病毒的抑制作用 | 第43-45页 |
| 3.8 ZDHHC2和ZDHHC19是催化nsP1蛋白棕榈酰化的主要酶 | 第45-47页 |
| 3.9 模式图 | 第47-48页 |
| 3.10 其他工作 | 第48-52页 |
| 四、讨论 | 第52-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 附表1: siRNA Oligo | 第62-63页 |
| 附表2: ZDHHC1-24质粒信息 | 第63-64页 |
| 附表3: 质粒构建引物序列 | 第64页 |
| 附表4: qPCR引物 | 第64-65页 |
| 附表5: ABE实验相关溶液 | 第65-66页 |
| 实验中用到nsP1及其突变体序列 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
