| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 主要符号表 | 第15-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-25页 |
| 1.2 持绿性的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 持绿性状的普遍性 | 第16-17页 |
| 1.2.2 持绿表型的分类 | 第17-18页 |
| 1.2.3 持绿性状的遗传分析 | 第18页 |
| 1.2.4 持绿表型的生理机制 | 第18-20页 |
| 1.2.4.1 叶绿素的合成与降解对持绿性状的影响 | 第19-20页 |
| 1.2.4.2 植物激素处理对持绿性状的影响 | 第20页 |
| 1.3 持绿性状的QTL定位 | 第20-21页 |
| 1.4 持绿性状在遗传育种中的应用 | 第21-23页 |
| 1.5 持绿性状在水稻中的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第25页 |
| 2.1.3 实验试剂与仪器 | 第25-28页 |
| 2.1.3.1 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3.2 实验仪器 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-42页 |
| 2.2.1 水稻总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第29页 |
| 2.2.3 OsPPDK目的基因的获得 | 第29-30页 |
| 2.2.4 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及纯化回收 | 第30-31页 |
| 2.2.5 OsPPDK基因生物信息学分析 | 第31页 |
| 2.2.6 OsPPDK基因的荧光定量分析 | 第31-32页 |
| 2.2.6.1 OsPPDK基因在四个时期的表达量分析 | 第31-32页 |
| 2.2.6.2 OsPPDK基因在不同N浓度处理下的表达量分析 | 第32页 |
| 2.2.7 OsPPDK基因RNAi载体及超表达载体构建 | 第32-39页 |
| 2.2.7.1 OsPPDK基因RNAi载体构建 | 第32-36页 |
| 2.2.7.2 OsPPDK基因超表达载体构建 | 第36-39页 |
| 2.2.8 水稻遗传转化 | 第39-40页 |
| 2.2.8.1 金23B及R287种子胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第39页 |
| 2.2.8.2 农杆菌(EHA105)介导的水稻遗传转化 | 第39-40页 |
| 2.2.9 水稻基因组DNA的提取 | 第40页 |
| 2.2.10 转基因植株的阳性检测 | 第40页 |
| 2.2.11 转化株OsPPDK基因的荧光定量分析 | 第40-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-60页 |
| 3.1 水稻RNA的提取及检测 | 第42页 |
| 3.2 OsPPDK基因克隆 | 第42-43页 |
| 3.3 水稻OsPPDK基因序列的生物信息学分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 OsPPDK基因编码氨基酸的一级结构预测 | 第45页 |
| 3.3.2 OsPPDK蛋白的二级结构预测 | 第45-46页 |
| 3.3.3 OsPPDK蛋白的功能结构域预测 | 第46页 |
| 3.3.4 OsPPDK蛋白疏水性/亲水性预测 | 第46页 |
| 3.3.5 OsPPDK蛋白信号肽预测与分析 | 第46-47页 |
| 3.3.6 OsPPDK蛋白三级结构预测 | 第47页 |
| 3.3.7 OsPPDK蛋白的活性位点分析 | 第47-48页 |
| 3.3.8 OsPPDK蛋白的氨基酸同源性分析及进化树 | 第48-49页 |
| 3.4 水稻OsPPDK基因的表达量分析 | 第49-53页 |
| 3.4.1 在不同时期OsPPDK不同组织部位表达量分析 | 第50-51页 |
| 3.4.2 不同N浓度处理下OsPPDK基因表达量分析 | 第51-53页 |
| 3.5 ds1301-OsPPDK和pU1300-OsPPDK载体构建及鉴定 | 第53-56页 |
| 3.5.1 ds1301-OsPPDK RNAi载体干扰片段扩增及其载体构建 | 第53-55页 |
| 3.5.1.1 RNAi干扰片段设计 | 第53页 |
| 3.5.1.2 RNAi干扰片段PCR扩增 | 第53页 |
| 3.5.1.3 干扰片段的中间克隆载体构建 | 第53-54页 |
| 3.5.1.4 植物表达载体ds1301-OsPPDK RNAi载体构建与农杆菌转化 | 第54-55页 |
| 3.5.2 pU1300-OsPPDK超表达载体片段扩增及其载体构建 | 第55-56页 |
| 3.5.2.1 pU1300-OsPPDK超表达载体片段扩增 | 第55页 |
| 3.5.2.2 植物表达载体pU1300-OsPPDK超表达载体构建与农杆菌转化 | 第55-56页 |
| 3.6 农杆菌介导水稻愈伤组织遗传转化及其分化 | 第56页 |
| 3.7 阳性植株的检测 | 第56-57页 |
| 3.8 阳性转化株基因表达量分析 | 第57-60页 |
| 3.8.1 pU1300-OsPPDK超表达阳性转化株基因表达量分析 | 第58页 |
| 3.8.2 ds1301-OsPPDKRNAi阳性转化株基因表达量分析 | 第58-60页 |
| 第4章 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
