| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 植物雄性不育 | 第10页 |
| 1.2 植物细胞质雄性不育的分子机制 | 第10-14页 |
| 1.2.1 CMS基因的结构特点 | 第11-12页 |
| 1.2.2 线粒体RNA的编辑加工与CMS | 第12-13页 |
| 1.2.3 核质互作与CMS | 第13页 |
| 1.2.4 线粒体内Sublimon与CMS | 第13-14页 |
| 1.3 细胞质雄性不育的败育假说 | 第14-16页 |
| 1.3.1 毒性蛋白假说 | 第14页 |
| 1.3.2 能量缺陷假说 | 第14-15页 |
| 1.3.3 异常的细胞程序性死亡模型 | 第15页 |
| 1.3.4 反向调控模型 | 第15-16页 |
| 1.4 玉米细胞质雄性不育的分类 | 第16-17页 |
| 1.5 玉米不同胞质败育机理的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 植物细胞质雄性不育育性恢复机理 | 第18-19页 |
| 1.7 玉米细胞质雄性不育在育种上的应用 | 第19页 |
| 2 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 3 技术路线 | 第20-21页 |
| 4 材料和方法 | 第21-35页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第21页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制 | 第21-22页 |
| 4.2 方法 | 第22-35页 |
| 4.2.1 材料种植 | 第22页 |
| 4.2.2 材料取样 | 第22页 |
| 4.2.3 玉米线粒体的分离 | 第22-23页 |
| 4.2.4 玉米线粒体DNA的提取 | 第23页 |
| 4.2.5 玉米线粒体RNA的提取 | 第23-24页 |
| 4.2.6 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 4.2.7 cDNA第一链合成 | 第25页 |
| 4.2.8 全长atp6基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| 4.2.9 目的条带回收 | 第26-27页 |
| 4.2.10 目的片段的克隆测序 | 第27-28页 |
| 4.2.11 不同循环数下atp6基因PCR扩增的PCR扩增 | 第28页 |
| 4.2.12 atp6及atp6-c基因的qRT-PCR分析 | 第28-29页 |
| 4.2.13 玉米不同组织中ATP含量的测定 | 第29-30页 |
| 4.2.14 atp6及atp6-c的原核表达分析 | 第30-33页 |
| 4.2.15 atp6及atp6-c的烟草转化分析 | 第33-35页 |
| 5 结果与分析 | 第35-54页 |
| 5.1 线粒体DNA及RNA的质量检测 | 第35-36页 |
| 5.1.1 线粒体DNA的质量检测 | 第35-36页 |
| 5.1.2 线粒体RNA的质量检测 | 第36页 |
| 5.2 线粒体DNA水平上atp6基因的扩增分析 | 第36-38页 |
| 5.3 线粒体RNA水平上atp6基因的转录分析 | 第38页 |
| 5.4 atp6及atp6-c的qRT-PCR分析 | 第38-45页 |
| 5.4.1 溶解曲线及标准曲线的绘制 | 第38-39页 |
| 5.4.2 atp6-c荧光定量表达分析 | 第39-42页 |
| 5.4.3 atp6的荧光定量表达分析 | 第42-45页 |
| 5.5 玉米不同组织中ATP含量的分析 | 第45-49页 |
| 5.5.1 ATP标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
| 5.5.2 ATP含量分析 | 第46-49页 |
| 5.6 线粒体基因atp6及atp6-c的原核表达分析 | 第49-51页 |
| 5.6.1 目的片段的扩增 | 第49页 |
| 5.6.2 原核表达载体的构建及验证 | 第49-50页 |
| 5.6.3 原核表达菌体诱导曲线 | 第50-51页 |
| 5.6.4 SDS-PAGE检测 | 第51页 |
| 5.7 植物表达载体的构建 | 第51-54页 |
| 5.7.1 目的片段的扩增 | 第51-53页 |
| 5.7.2 表达载体的构建及验证 | 第53-54页 |
| 6 讨论 | 第54-57页 |
| 6.1 植物线粒体基因的存在形式及其生物学意义 | 第54-55页 |
| 6.2 玉米CMS-C中atp6及atp6-c的差异表达分析 | 第55页 |
| 6.3 玉米CMS-C不同组织中ATP含量分析 | 第55-56页 |
| 6.4 线粒体基因atp6及atp6-c的原核表达分析 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
