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玉米CMS-C线粒体基因atp6及atp6-c的表达分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 文献综述第10-19页
    1.1 植物雄性不育第10页
    1.2 植物细胞质雄性不育的分子机制第10-14页
        1.2.1 CMS基因的结构特点第11-12页
        1.2.2 线粒体RNA的编辑加工与CMS第12-13页
        1.2.3 核质互作与CMS第13页
        1.2.4 线粒体内Sublimon与CMS第13-14页
    1.3 细胞质雄性不育的败育假说第14-16页
        1.3.1 毒性蛋白假说第14页
        1.3.2 能量缺陷假说第14-15页
        1.3.3 异常的细胞程序性死亡模型第15页
        1.3.4 反向调控模型第15-16页
    1.4 玉米细胞质雄性不育的分类第16-17页
    1.5 玉米不同胞质败育机理的研究进展第17-18页
    1.6 植物细胞质雄性不育育性恢复机理第18-19页
    1.7 玉米细胞质雄性不育在育种上的应用第19页
2 本研究的目的意义第19-20页
3 技术路线第20-21页
4 材料和方法第21-35页
    4.1 材料与试剂第21-22页
        4.1.1 供试材料第21页
        4.1.2 主要试剂及配制第21-22页
    4.2 方法第22-35页
        4.2.1 材料种植第22页
        4.2.2 材料取样第22页
        4.2.3 玉米线粒体的分离第22-23页
        4.2.4 玉米线粒体DNA的提取第23页
        4.2.5 玉米线粒体RNA的提取第23-24页
        4.2.6 总RNA的提取第24-25页
        4.2.7 cDNA第一链合成第25页
        4.2.8 全长atp6基因的PCR扩增第25-26页
        4.2.9 目的条带回收第26-27页
        4.2.10 目的片段的克隆测序第27-28页
        4.2.11 不同循环数下atp6基因PCR扩增的PCR扩增第28页
        4.2.12 atp6及atp6-c基因的qRT-PCR分析第28-29页
        4.2.13 玉米不同组织中ATP含量的测定第29-30页
        4.2.14 atp6及atp6-c的原核表达分析第30-33页
        4.2.15 atp6及atp6-c的烟草转化分析第33-35页
5 结果与分析第35-54页
    5.1 线粒体DNA及RNA的质量检测第35-36页
        5.1.1 线粒体DNA的质量检测第35-36页
        5.1.2 线粒体RNA的质量检测第36页
    5.2 线粒体DNA水平上atp6基因的扩增分析第36-38页
    5.3 线粒体RNA水平上atp6基因的转录分析第38页
    5.4 atp6及atp6-c的qRT-PCR分析第38-45页
        5.4.1 溶解曲线及标准曲线的绘制第38-39页
        5.4.2 atp6-c荧光定量表达分析第39-42页
        5.4.3 atp6的荧光定量表达分析第42-45页
    5.5 玉米不同组织中ATP含量的分析第45-49页
        5.5.1 ATP标准曲线的绘制第45-46页
        5.5.2 ATP含量分析第46-49页
    5.6 线粒体基因atp6及atp6-c的原核表达分析第49-51页
        5.6.1 目的片段的扩增第49页
        5.6.2 原核表达载体的构建及验证第49-50页
        5.6.3 原核表达菌体诱导曲线第50-51页
        5.6.4 SDS-PAGE检测第51页
    5.7 植物表达载体的构建第51-54页
        5.7.1 目的片段的扩增第51-53页
        5.7.2 表达载体的构建及验证第53-54页
6 讨论第54-57页
    6.1 植物线粒体基因的存在形式及其生物学意义第54-55页
    6.2 玉米CMS-C中atp6及atp6-c的差异表达分析第55页
    6.3 玉米CMS-C不同组织中ATP含量分析第55-56页
    6.4 线粒体基因atp6及atp6-c的原核表达分析第56-57页
参考文献第57-64页
致谢第64页

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