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猪受精及早期胚胎发育相关因子的筛选与功能解析

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 引言第12-28页
    1.1 猪体外受精研究进展第12-17页
        1.1.1 猪体外受精简述第12页
        1.1.2 影响猪体外受精的主要因素第12-15页
        1.1.3 精子解凝集第15-16页
        1.1.4 体外受精的应用第16-17页
    1.2 早期胚胎发育第17-24页
        1.2.1 早期胚胎发育过程简述第17-18页
        1.2.2 合子基因激活(ZGA)第18-23页
        1.2.3 早期胚胎发育相关基因的研究第23-24页
    1.3 长非编码RNA第24-27页
        1.3.1 长非编码RNA简述第24-25页
        1.3.2 长非编码RNA的调控第25-27页
        1.3.3 长非编码RNA与早期胚胎发育第27页
    1.4 本研究的目的和意义第27-28页
2 材料与方法第28-38页
    2.1 实验材料第28-31页
        2.1.1 实验动物第28页
        2.1.2 主要仪器设备第28-29页
        2.1.3 主要试剂及试剂盒第29页
        2.1.4 常用试剂及配置第29-31页
        2.1.5 主要分析软件及数据库第31页
    2.2 实验方法第31-38页
        2.2.1 胚胎操作(IVF,ICSI)第31-32页
        2.2.2 免疫荧光检测第32页
        2.2.3 蛋白质组分析第32页
        2.2.4 显微注射第32页
        2.2.5 PDIA3体外转录第32-33页
        2.2.6 DTT预处理精子第33页
        2.2.7 精子解聚程度的评定第33页
        2.2.8 数据分析第33-34页
        2.2.9 Realtime PCR第34-36页
        2.2.10 链特异性PCR第36页
        2.2.11 RNA干扰第36-38页
3 结果与分析第38-55页
    3.1 猪IVM时间对IVF及早期胚胎发育的影响第38-39页
        3.1.1 猪IVM时间对受精率的影响第38页
        3.1.2 猪IVM时间对精子解聚的影响第38页
        3.1.3 猪IVM时间对原核形成的影响第38-39页
        3.1.4 猪IVM时间对早期胚胎发育的影响第39页
    3.2 母源PDIA3在精子解聚中的功能研究第39-44页
        3.2.1 蛋白质组学分析第39-40页
        3.2.2 干扰和过表达母源PDIA3对受精卵中精子解聚的影响第40-43页
        3.2.3 母源PDIA3通过清除二硫键促进精子解聚第43-44页
    3.3 猪早期胚胎发育中lincRNA的预测及功能分析第44-48页
        3.3.1 猪新的lincRNA预测结果第44页
        3.3.2 加权基因共表达网络分析结果第44-48页
        3.3.3 lincRNA的功能富集分析结果第48页
    3.4 猪早期胚胎发育中特定lincRNA的功能研究第48-55页
        3.4.1 猪早期胚胎中特定lincRNA的序列验证第48-51页
        3.4.2 猪早期胚胎中特定lincRNA转录方向验证第51-52页
        3.4.3 猪早期胚胎中特定lincRNA的表达模式验证第52页
        3.4.4 干扰lincRNA对猪早期胚胎发育的影响第52-55页
4 讨论第55-59页
    4.1 卵母细胞质量对体外受精及早期胚胎发育的影响第55-56页
    4.2 母源PDIA3在精子解聚中的功能第56页
    4.3 Linc-370和linc-255在猪早期胚胎发育中的功能第56-59页
5 结论第59-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-74页
攻读博士学位期间发表的学术论文第74页

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