摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-28页 |
1.1 猪体外受精研究进展 | 第12-17页 |
1.1.1 猪体外受精简述 | 第12页 |
1.1.2 影响猪体外受精的主要因素 | 第12-15页 |
1.1.3 精子解凝集 | 第15-16页 |
1.1.4 体外受精的应用 | 第16-17页 |
1.2 早期胚胎发育 | 第17-24页 |
1.2.1 早期胚胎发育过程简述 | 第17-18页 |
1.2.2 合子基因激活(ZGA) | 第18-23页 |
1.2.3 早期胚胎发育相关基因的研究 | 第23-24页 |
1.3 长非编码RNA | 第24-27页 |
1.3.1 长非编码RNA简述 | 第24-25页 |
1.3.2 长非编码RNA的调控 | 第25-27页 |
1.3.3 长非编码RNA与早期胚胎发育 | 第27页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-38页 |
2.1 实验材料 | 第28-31页 |
2.1.1 实验动物 | 第28页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第29页 |
2.1.4 常用试剂及配置 | 第29-31页 |
2.1.5 主要分析软件及数据库 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-38页 |
2.2.1 胚胎操作(IVF,ICSI) | 第31-32页 |
2.2.2 免疫荧光检测 | 第32页 |
2.2.3 蛋白质组分析 | 第32页 |
2.2.4 显微注射 | 第32页 |
2.2.5 PDIA3体外转录 | 第32-33页 |
2.2.6 DTT预处理精子 | 第33页 |
2.2.7 精子解聚程度的评定 | 第33页 |
2.2.8 数据分析 | 第33-34页 |
2.2.9 Realtime PCR | 第34-36页 |
2.2.10 链特异性PCR | 第36页 |
2.2.11 RNA干扰 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-55页 |
3.1 猪IVM时间对IVF及早期胚胎发育的影响 | 第38-39页 |
3.1.1 猪IVM时间对受精率的影响 | 第38页 |
3.1.2 猪IVM时间对精子解聚的影响 | 第38页 |
3.1.3 猪IVM时间对原核形成的影响 | 第38-39页 |
3.1.4 猪IVM时间对早期胚胎发育的影响 | 第39页 |
3.2 母源PDIA3在精子解聚中的功能研究 | 第39-44页 |
3.2.1 蛋白质组学分析 | 第39-40页 |
3.2.2 干扰和过表达母源PDIA3对受精卵中精子解聚的影响 | 第40-43页 |
3.2.3 母源PDIA3通过清除二硫键促进精子解聚 | 第43-44页 |
3.3 猪早期胚胎发育中lincRNA的预测及功能分析 | 第44-48页 |
3.3.1 猪新的lincRNA预测结果 | 第44页 |
3.3.2 加权基因共表达网络分析结果 | 第44-48页 |
3.3.3 lincRNA的功能富集分析结果 | 第48页 |
3.4 猪早期胚胎发育中特定lincRNA的功能研究 | 第48-55页 |
3.4.1 猪早期胚胎中特定lincRNA的序列验证 | 第48-51页 |
3.4.2 猪早期胚胎中特定lincRNA转录方向验证 | 第51-52页 |
3.4.3 猪早期胚胎中特定lincRNA的表达模式验证 | 第52页 |
3.4.4 干扰lincRNA对猪早期胚胎发育的影响 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
4.1 卵母细胞质量对体外受精及早期胚胎发育的影响 | 第55-56页 |
4.2 母源PDIA3在精子解聚中的功能 | 第56页 |
4.3 Linc-370和linc-255在猪早期胚胎发育中的功能 | 第56-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-74页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |