| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 肿瘤中代谢的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 苹果酸酶(ME) 在癌症中的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 肾癌的研究基础及其分子机制 | 第11-14页 |
| 1.4 技术路线图 | 第14页 |
| 1.5 课题主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-32页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第16-19页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第19-32页 |
| 2.2.1 细胞复苏与传代培养 | 第19页 |
| 2.2.2 RNA提取步骤 | 第19-21页 |
| 2.2.3 q RT-PCR实验 | 第21页 |
| 2.2.4 肾癌蛋白及细胞蛋白提取 | 第21-22页 |
| 2.2.5 Western blot实验 | 第22-23页 |
| 2.2.6 免疫组化实验(IHC) | 第23-24页 |
| 2.2.7 慢病毒载体PLKO.1-sh RNA的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.8 逆转录病毒载体p HR-ME1 和p HR-ME2 的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.9 293T细胞中病毒包装及感染肾癌细胞系 | 第26-28页 |
| 2.2.10 酶活测定 | 第28-29页 |
| 2.2.11 MTT法检测细胞增殖 | 第29-30页 |
| 2.2.12 流式细胞仪检测细胞周期 | 第30页 |
| 2.2.13 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 2.2.14 流式细胞仪检测细胞ROS | 第31-32页 |
| 第3章 ME1 和ME2 在肾癌中的表达差异 | 第32-42页 |
| 3.1 肾癌组织中ME1 和ME2 的RNA水平的改变 | 第32-33页 |
| 3.2 ME1 和ME2 在肾癌组织中蛋白水平的差异 | 第33-35页 |
| 3.3 免疫组化方法检测肾癌组织样本之间的差异 | 第35-38页 |
| 3.4 肾癌细胞系中的表达差异 | 第38-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 ME1 在肾癌细胞内生物学功能研究 | 第42-49页 |
| 4.1 ME1 在肾癌细胞系增殖方面的影响 | 第42-44页 |
| 4.2 ME1 在细胞凋亡方面的影响 | 第44-46页 |
| 4.3 ME1 在细胞周期阻滞方面的影响 | 第46-47页 |
| 4.4 ME1 对肾癌细胞中ROS的影响 | 第47页 |
| 4.5 本章小结 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 实验数据 | 第50-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
