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不同浓度氯化锌对紫外线损伤的人晶状体上皮细胞的影响及作用机制研究

提要第3-4页
Abstract第4-5页
引言第8-11页
1. 材料与方法第11-28页
    1.1 实验材料第11-15页
        1.1.1 培养细胞第11页
        1.1.2 细胞培养相关试剂及配制第11-12页
        1.1.3 实时荧光定量PCR相关试剂第12-13页
        1.1.4 其他实验相关试剂第13-14页
        1.1.5 主要仪器与设备第14-15页
    1.2 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究的实验步骤和方法第15-23页
        1.2.1 晶状体上皮细胞培养、传代、冻存及复苏第15-16页
        1.2.2 紫外线照射第16页
        1.2.3 实时细胞电子分析第16-17页
        1.2.4 流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化第17-18页
        1.2.5 细胞内活性氧水平的检测第18-19页
        1.2.6 Annexin V-FITC/PI染色法细胞凋亡的检测第19-20页
        1.2.7 细胞内Ca~(2+)水平的检测第20页
        1.2.8 实时荧光定量PCR第20-21页
        1.2.9 ELISA检测PMCA1、PMCA4、SERCA2b及SERCA3蛋白表达的变化第21-22页
        1.2.10 统计学分析第22-23页
    1.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究的实验步骤和方法第23-28页
        1.3.1 晶状体上皮细胞培养、传代、冻存及复苏第23页
        1.3.2 ZnCl_2溶液的配制第23页
        1.3.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞生存的影响第23-24页
        1.3.4 线粒体膜电位的变化第24-25页
        1.3.5 细胞周期的检测第25页
        1.3.6 细胞凋亡的检测第25-26页
        1.3.7 实时荧光定量PCR第26页
        1.3.8 ELISA检测相关蛋白表达的变化第26-27页
        1.3.9 统计学分析第27-28页
2. 结果第28-45页
    2.1 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究第28-35页
        2.1.1 实时细胞电子分析第28-29页
        2.1.2 流式细胞仪检测 ΔΨm变化第29-30页
        2.1.3 流式细胞仪检测细胞内ROS变化第30-31页
        2.1.4 Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡第31-32页
        2.1.5 细胞内Ca~(2+)水平的检测第32-33页
        2.1.6 PMCA1, PMCA4, SERCA2b和SERCA3基因和蛋白表达水平的检测第33-35页
    2.2 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究第35-45页
        2.2.1 细胞形态的观察第35页
        2.2.2 MTT法检测第35-36页
        2.2.3 RT-CES分析第36-38页
        2.2.4 ΔΨm变化第38页
        2.2.5 细胞周期检测第38-39页
        2.2.6 细胞凋亡的检测第39-42页
        2.2.7 细胞内TGF-β1,Caspase-12,Caspase-9 和TNF-α 基因及蛋白水平检测第42-45页
3. 讨论第45-51页
    3.1 ZnCl_2对HLE B-3 细胞生长的影响第45页
    3.2 ZnCl_2对UVB损伤的保护作用研究第45-48页
    3.3 高浓度ZnCl_2对晶状体上皮细胞的损伤机制研究第48-51页
4. 结语第51-52页
参考文献第52-59页
中英文对照第59-61页
附录第61-63页
致谢第63-64页
论文著作第64-66页
详细摘要第66-70页

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