| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-28页 |
| 1.1 白血病 | 第16-18页 |
| 1.1.1 白血病 | 第16页 |
| 1.1.2 白血病的分类 | 第16-17页 |
| 1.1.3 急性髓系白血病(AML) | 第17-18页 |
| 1.2 AML的治疗现状与预后 | 第18-19页 |
| 1.2.1 AML的治疗现状 | 第18-19页 |
| 1.2.2 AML的复发与化疗耐药性 | 第19页 |
| 1.3 DNA损伤应答(TheDNAdamageresponse,DDR) | 第19-20页 |
| 1.4 CHK1 | 第20-22页 |
| 1.5 CHK1与AML | 第22-23页 |
| 1.6 CHK1抑制剂 | 第23-25页 |
| 1.7 本论文的研究内容及意义 | 第25-28页 |
| 第二章 CHK1抑制剂LY2603618抗AML活性及机制以及其与ABT-199协同抗AML活性的研究 | 第28-68页 |
| 2.1 背景 | 第28-30页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第30-35页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.2.2 实验试剂与耗材 | 第30-31页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第31-34页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-43页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第35-37页 |
| 2.3.2 用MTT法测定药物的IC50值 | 第37页 |
| 2.3.3 Real-TimeRT-PCR检测AML患者临床样本中CHK1转录水平 | 第37-38页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析 | 第38-39页 |
| 2.3.5 流式细胞术检测药物对AML细胞株及患者临床血样细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.6 流式细胞术检测药物对AML细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.7 基因过表达细胞与基因沉默细胞的制备 | 第41-42页 |
| 2.3.8 彗星实验 | 第42-43页 |
| 2.3.9 MTT法检测LY2603618和ABT-199联合用药对AML患者临床样本细胞生长的影响 | 第43页 |
| 2.4 实验结果 | 第43-64页 |
| 2.4.1 LY2603618在AML患者临床诊断样本中具有抗白血病活性 | 第43-45页 |
| 2.4.2 LY2603618在AML细胞株中具有抗白血病活性 | 第45-46页 |
| 2.4.3 改变AML细胞中CHK1的表达水平对LY2603618抗AML活性的影响 | 第46-47页 |
| 2.4.4 LY2603618经Bak依赖的细胞凋亡途径诱导AML细胞调亡 | 第47-49页 |
| 2.4.5 LY2603618可以减少AML细胞中G2/M期的细胞比例 | 第49-51页 |
| 2.4.6 LY2603618在AML细胞中以部分依赖CDK活性的方式引起DNA损伤 | 第51-52页 |
| 2.4.7 LY2603618在AML细胞中诱发的细胞凋亡亦部分依赖CDK活性 | 第52-53页 |
| 2.4.8 在AML细胞中LY2603618下调Mcl-1表达水平 | 第53-56页 |
| 2.4.9 在AML细胞中,LY2603618诱导的DNA损伤和Mcl-1下调与细胞凋亡的关系 | 第56-58页 |
| 2.4.10 在AML细胞中,LY2603618可以增强ABT-199诱导的细胞凋亡.. | 第58-61页 |
| 2.4.11 在AML患者临床样本细胞中,LY2603618可以增强ABT-199诱导的细胞凋亡 | 第61-64页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第64-68页 |
| 第三章 靶向CHK1信号通路杀伤Ara-C耐药AML细胞的活性及机制研究 | 第68-96页 |
| 3.1 背景 | 第68-69页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第69-70页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第69页 |
| 3.2.2 实验试剂与耗材 | 第69页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第69页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第69-70页 |
| 3.3 实验方法 | 第70-72页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第70页 |
| 3.3.2 用MTT法测定药物的IC50值 | 第70页 |
| 3.3.3 台盼蓝染色计数法 | 第70-71页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析 | 第71页 |
| 3.3.5 流式细胞术检测药物对AML细胞及正常人外周血单核细胞死亡的影响 | 第71页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测药物对AML细胞周期的影响 | 第71页 |
| 3.3.7 细胞集落形成实验 | 第71-72页 |
| 3.4 实验结果 | 第72-92页 |
| 3.4.1 Ara-C耐药AML细胞株的构建与鉴定 | 第72-74页 |
| 3.4.2 Ara-C耐药AML细胞株与母本细胞株的细胞增殖与周期差异 | 第74-75页 |
| 3.4.3 Ara-C耐药AML细胞株中CHK1表达水平升高 | 第75-76页 |
| 3.4.4 Ara-C耐药AML细胞株对CHK1抑制剂敏感 | 第76-77页 |
| 3.4.5 LY2603618可以诱导Ara-C耐药AML细胞株死亡 | 第77-78页 |
| 3.4.6 LY2603618对Ara-C耐药AML细胞株细胞周期进程的影响 | 第78-79页 |
| 3.4.7 LY2603618可以诱导Ara-C耐药AML细胞株产生DNA损伤并下调细胞周期相关蛋白表达 | 第79-80页 |
| 3.4.8 Ara-C耐药AML细胞株对ATR抑制剂敏感 | 第80-82页 |
| 3.4.9 LY2603618和AZD6738在Ara-C耐药AML细胞株中具有协同抗AML活性 | 第82页 |
| 3.4.10 LY2603618和AZD6738可以协同诱导Ara-C耐药AML细胞死亡.. | 第82-83页 |
| 3.4.11 LY2603618和AZD6738联合用药对Ara-C耐药AML细胞周期进程的影响 | 第83-84页 |
| 3.4.12 LY2603618和AZD6738联合用药可以诱导Ara-C耐药AML细胞株产生更多的DNA损伤并下调细胞周期相关蛋白表达 | 第84-85页 |
| 3.4.13 LY2603618与AZD6738联合用药对正常人外周血单核细胞毒性作用 | 第85-87页 |
| 3.4.14 LY2603618与AZD6738联合用药对正常人骨髓单核细胞毒性作用. | 第87-88页 |
| 3.4.15 Ara-C耐药AML细胞株对WEE1抑制剂MK1775敏感 | 第88-89页 |
| 3.4.16 LY2603618和MK-1775在Ara-C耐药AML细胞株中具有协同抗AML活性 | 第89-90页 |
| 3.4.17 LY2603618和MK-1775联合用药对正常人外周血单核细胞毒性作用 | 第90-92页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第92-96页 |
| 结论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 硕博连读期间发表的论文 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
