| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 HARBI1蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.1 HARBI1蛋白的分子结构特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2 HARBI1蛋白理化性质 | 第13页 |
| 1.1.3 HARBI1蛋白研究进展 | 第13页 |
| 1.2 双子叶植物叶片发育研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 子叶的形成 | 第13-14页 |
| 1.2.2 叶原基的极性分化 | 第14页 |
| 1.2.3 植物激素对拟南芥叶片发育的调控 | 第14-17页 |
| 1.3 细胞分裂素 | 第17-19页 |
| 1.3.1 细胞分裂素的合成 | 第17-18页 |
| 1.3.2 细胞分裂素的降解 | 第18-19页 |
| 1.3.3 细胞分裂素的信号转导途径 | 第19页 |
| 1.4 生长素 | 第19-23页 |
| 1.4.1 生长素的生物合成 | 第20-21页 |
| 1.4.2 生长素的降解 | 第21-22页 |
| 1.4.3 生长素的信号转导途径 | 第22-23页 |
| 1.5 中间锦鸡儿 | 第23页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.7 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 实验材料和方法 | 第25-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌种 | 第25页 |
| 2.1.3 质粒 | 第25页 |
| 2.2 实验药品 | 第25-30页 |
| 2.2.1 实验试剂及酶 | 第25-26页 |
| 2.2.2 试剂盒 | 第26页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2.4 培养基及所需其他化学试剂的配制 | 第27-30页 |
| 2.3 实验仪器 | 第30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-39页 |
| 2.4.1 植物材料培养与处理方法 | 第30-31页 |
| 2.4.2 植物gDNA、总RNA提取及cDNA的获得 | 第31页 |
| 2.4.3 基因表达量的检测 | 第31页 |
| 2.4.4 中间锦鸡儿CiHARBI1全长cDNA的克隆 | 第31-32页 |
| 2.4.5 目的片段胶回收 | 第32页 |
| 2.4.6 目的基因与克隆载体的连接 | 第32页 |
| 2.4.7 目的片段转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第32-33页 |
| 2.4.8 质粒提取 | 第33页 |
| 2.4.9 中间锦鸡儿CiHARBI1基因序列分析 | 第33页 |
| 2.4.10 启动子克隆及分析 | 第33页 |
| 2.4.11 中间锦鸡儿CiHARBI1基因表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 2.4.12 拟南芥的遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.4.13 转基因植物纯合体的筛选 | 第36-37页 |
| 2.4.14 超表达植株的表型观察 | 第37页 |
| 2.4.15 GUS组织化学染色 | 第37页 |
| 2.4.16 GFP亚细胞定位观察 | 第37-38页 |
| 2.4.17 超表达株系激素含量的测定 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 中间锦鸡儿CiHARBI1基因全长cDNA的克隆 | 第39页 |
| 3.2 中间锦鸡儿CiHARBI1生物信息学分析 | 第39-43页 |
| 3.2.1 中间锦鸡儿CiHARBI1基因序列分析 | 第39页 |
| 3.2.2 CiHARBI1蛋白理化性质分析 | 第39页 |
| 3.2.3 CiHARBI1蛋白的二级结构预测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 CiHARBI1蛋白功能结构域预测和分析 | 第40-41页 |
| 3.2.5 CiHARBI1蛋白与其他物种HARBI1类蛋白多重比对 | 第41-42页 |
| 3.2.6 CiHARBI1蛋白的系统进化树分析 | 第42-43页 |
| 3.3 中间锦鸡儿CiHARBI1基因表达特性分析 | 第43页 |
| 3.4 CiHARBI1基因超表达纯合体的筛选及表达量的检测 | 第43-45页 |
| 3.4.1 超表达载体pCanG-CiHARBI1的构建 | 第43页 |
| 3.4.2 超表达CiHARBI1转基因株系的获得 | 第43-44页 |
| 3.4.3 超表达纯合体中CiHARBI1的表达水平检测 | 第44-45页 |
| 3.5 转基因拟南芥表型分析 | 第45-51页 |
| 3.5.1 超表达植株子叶顶轴位置形成凹陷 | 第45-46页 |
| 3.5.2 超表达植株子叶叶表皮细胞交联度改变 | 第46-48页 |
| 3.5.3 高量超表达株系细胞分裂素反应及叶片玻璃化现象 | 第48-49页 |
| 3.5.4 超表达植株莲座叶形态改变 | 第49页 |
| 3.5.5 超表达植株抽薹时间较晚 | 第49-51页 |
| 3.6 CiHARBI1的亚细胞定位观察 | 第51页 |
| 3.6.1 CiHARBI1的GFP融合载体的构建 | 第51页 |
| 3.6.2 CiHARBI1在稳定表达株系中的亚细胞定位观察 | 第51页 |
| 3.7 CiHARBI1的启动子克隆与GUS组织化学染色 | 第51-56页 |
| 3.7.1 CiHARBI1的启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第51-54页 |
| 3.7.2 CiHARBI1的启动子驱动GUS报告基因表达载体构建 | 第54页 |
| 3.7.3 GUS组织化学染色 | 第54-56页 |
| 3.8 CiHARBI1转基因拟南芥中激素含量发生变化 | 第56-58页 |
| 3.8.1 高量超表达植株细胞分裂素含量明显上升 | 第56页 |
| 3.8.2 高量超表达植株生长素含量有所下降 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 4.1 CiHARBI1的序列分析及功能预测 | 第58页 |
| 4.2 CiHARBI1的表达模式分析 | 第58-60页 |
| 4.3 CiHARBI1通过调控生长素稳态影响扁平细胞分化 | 第60页 |
| 4.4 CiHARBI1的作用方式可能具有剂量效应进而调控了子叶叶片形态 | 第60-61页 |
| 4.5 CiHARBI1超表达对植物激素含量的影响 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
