| 提要 | 第1-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-18页 |
| ·胞内抗体与肿瘤治疗 | 第10-14页 |
| ·抗体和基因工程抗体 | 第10-11页 |
| ·单链抗体的优点 | 第11页 |
| ·胞内抗体 | 第11-14页 |
| ·胞内抗体的制备 | 第12页 |
| ·胞内抗体的优势 | 第12-13页 |
| ·胞内抗体面临的挑战 | 第13页 |
| ·胞内抗体的作用 | 第13-14页 |
| ·胞内抗体在动物研究和临床试验中的应用 | 第14页 |
| ·细胞周期与肿瘤治疗 | 第14-17页 |
| ·细胞周期及时相转换 | 第14-16页 |
| ·细胞周期调控机制 | 第16页 |
| ·乳腺癌基因治疗进展 | 第16-17页 |
| ·本研究的立题依据 | 第17-18页 |
| 第2章 实验材料及方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-22页 |
| ·实验中用到的细胞株、菌株和质粒 | 第18页 |
| ·引物序列 | 第18页 |
| ·试剂与溶液 | 第18-20页 |
| ·材料试剂 | 第18-20页 |
| ·实验中溶液配制 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·计算机辅助工具 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·细胞培养与细胞转染用质粒的准备 | 第22-23页 |
| ·细胞培养 | 第22页 |
| ·用于细胞转染质粒的准备 | 第22-23页 |
| ·脂质体介导的肿瘤细胞转染实验 | 第23-25页 |
| ·瞬时转染实验 | 第23-24页 |
| ·稳定转染实验 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第25-26页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第26页 |
| ·Western-blot 分析 | 第26页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第26-27页 |
| ·流式细胞术分析细胞周期 | 第27页 |
| ·AnnexinV/PI 双染分析细胞凋亡 | 第27-28页 |
| ·乳腺癌裸鼠动物模型的建立 | 第28页 |
| ·乳腺癌裸鼠动物模型的基因治疗 | 第28-29页 |
| ·统计学分析 | 第29-30页 |
| 第3章 实验结果 | 第30-45页 |
| ·NLS-AK 在MCF-7 细胞中的基因表达及抗肿瘤效应分析 | 第30-40页 |
| ·NLS-AK 在瞬时转染MCF-7 细胞中的表达分析 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第30页 |
| ·间接免疫荧光分析NLS-AK 的胞内表达及定位 | 第30-31页 |
| ·Western-blot 分析 | 第31页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第31页 |
| ·NLS-AK 在稳定转染MCF-7 细胞中的表达分析 | 第31-40页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第32页 |
| ·Western-blot 分析 | 第32页 |
| ·间接免疫荧光分析NLS-AK 的胞内表达及定位 | 第32-33页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第33页 |
| ·流式细胞术检测NLS-AK 对肿瘤细胞周期的阻滞 | 第33页 |
| ·流式细胞术检测NLS-AK 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第33-40页 |
| ·NLS-AK 对乳腺癌裸鼠动物模型治疗效果的评价 | 第40-45页 |
| ·瘤体观察 | 第40页 |
| ·瘤体生长状况分析 | 第40-41页 |
| ·荷瘤裸鼠瘤重抑制分析 | 第41页 |
| ·HE 染色病理学检测 | 第41-45页 |
| 第4章 讨论 | 第45-48页 |
| 第5章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 中文摘要 | 第57-60页 |
| ABSTRACT | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
