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通过遗传转化技术提高酵母生防效力的方法研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
简写词对照表(Abbreviatiolls)第12-17页
第一章 文献综述第17-28页
    1.1 前言第17页
    1.2 微生物防治第17-19页
        1.2.1 营养与空间竞争第18页
        1.2.2 诱导果实产生抗性第18页
        1.2.3 重寄生作用第18-19页
        1.2.4 分泌胞外水解酶等活性物质第19页
    1.3 遗传转化技术定向改造酵母第19-20页
    1.4 抗菌肽的研究进展及概述第20-24页
        1.4.1 抗菌肽的作用机理第21-23页
        1.4.2 抗菌肽在病害防治中的应用前景第23-24页
    1.5 细胞壁完整性信号通路(CWI)和Rho1蛋白概述第24-26页
        1.5.1 细胞壁完整性信号通路(CWI)第24-26页
        1.5.2 Rho1蛋白功能第26页
    1.6 本课题的研究意义及主要内容第26-28页
第二章 重组酿酒酵母rho1基因表达及其对CWI信号通路的影响第28-45页
    2.1 前言第28页
    2.2 材料和方法第28-37页
        2.2.1 实验仪器第28-29页
        2.2.2 培养基与酵母菌株第29-30页
        2.2.3 试验试剂第30页
        2.2.4 实验方法第30-37页
    2.3 结果与分析第37-43页
        2.3.1 重组酵母SC/rho1诱导表达第37-38页
        2.3.2 CWI信号通路相关基因检测第38-41页
        2.3.3 重组酵母细胞壁多糖组分分析第41-43页
    2.4 讨论第43-45页
第三章 重组酿酒酵母SC/rho1的生防效力分析和抑菌机理初探第45-65页
    3.1 前言第45-46页
    3.2 材料与方法第46-52页
        3.2.1 试验仪器第46页
        3.2.2 培养基与果实第46页
        3.2.3 酵母菌株和病原真菌第46-47页
        3.2.4 酵母细胞壁的制取第47页
        3.2.5 试验方法第47-52页
    3.3 结果与分析第52-62页
        3.3.1 活体重组酵母和灭活重组酵母对梨果实青霉病的直接抑制作用第52-54页
        3.3.2 活体重组酵母和灭活重组酵母对梨果实青霉病的诱导抗性作用第54-56页
        3.3.3 酵母果实伤口生长动态第56-57页
        3.3.4 酵母代谢产物对梨果实青霉病的抑制作用第57页
        3.3.5 酵母细胞壁浓度对梨果实青霉病抗性的影响第57-58页
        3.3.6 野生型与重组型酵母细胞壁诱导梨果实抗性的作用比较第58-59页
        3.3.7 重组酵母对梨果实抗性相关基因表达的影响第59-62页
    3.4 讨论第62-65页
第四章 Ace-AMP1、AC-AMP2和MiAMP1表达载体构建及转化第65-81页
    4.1 前言第65页
    4.2 材料和方法第65-72页
        4.2.1 试验仪器第65-66页
        4.2.2 培养基第66页
        4.2.3 菌株和质粒第66-67页
        4.2.4 试验试剂第67页
        4.2.5 试验方法第67-72页
    4.3 实验结果与分析第72-80页
        4.3.1 Ace-AMP1、AC-AMP2和MiAMP1目的基因的优化和合成第72-75页
        4.3.2 Ace-AMP1、AC-AMP2和MiAMP1目的基因检测第75-76页
        4.3.3 目的基因与pPICZα A表达载体的构建第76-78页
        4.3.4 重组表达载体向毕赤酵母GS115的转化第78-80页
    4.4 小结第80-81页
第五章 重组毕赤酵母GS115/Ace-AMP1、GS115/Ac-AMP2和GS115/MiAMP1抗菌肽的表达及抑菌效力评价第81-97页
    5.1 前言第81-82页
    5.2 材料和方法第82-86页
        5.2.1 试验仪器第82页
        5.2.2 培养基与果实第82页
        5.2.3 酵母菌株和病原菌第82-83页
        5.2.4 试验方法第83-86页
    5.3 实验结果第86-94页
        5.3.1 重组酵母抗菌肽基因检测第86-88页
        5.3.2 重组酵母抗菌肽Western-blot检测第88-89页
        5.3.3 重组酵母蛋白含量检测第89-91页
        5.3.4 抗菌肽对扩展青霉体外抑制影响第91-92页
        5.3.5 抗菌肽对梨果实青霉病的抑制作用第92-93页
        5.3.6 抗菌肽重组酵母对梨果实青霉病的抑制作用第93-94页
    5.4 讨论第94-97页
第六章 罗伦隐球酵母表达系统初探第97-107页
    6.1 前言第97页
    6.2 材料和方法第97-102页
        6.2.1 试验仪器第97-98页
        6.2.2 培养基第98页
        6.2.3 菌株与质粒第98页
        6.2.4 试验试剂第98-99页
        6.2.5 试验方法第99-102页
    6.3 实验结果第102-106页
        6.3.1 GAP启动子和罗伦隐球酵母25S rDNA获取第102-103页
        6.3.2 GAP启动子和罗伦隐球酵母25S rDNA与载体构建第103-104页
        6.3.3 GAP启动子和罗伦隐球酵母25S rDNA表达载体的验证第104-106页
    6.4 讨论第106-107页
第七章 结论与展望第107-110页
    7.1 主要研究结论第107-109页
    7.2 主要创新点第109页
    7.3 后续研究展望第109-110页
参考文献第110-119页
作者简介第119页

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