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6-姜酚对过氧化氢致HUVEC损伤的保护作用及机制探讨

中文摘要第9-13页
Abstract第13-17页
前言第18-20页
第一部分 6-姜酚通过自噬对过氧化氢致HUVEC凋亡的保护作用第20-51页
    (二) 材料和方法第20-25页
        1. 实验材料第20-21页
            1.1 主要药品与试剂第20-21页
            1.2 主要仪器第21页
            1.3 实验对象第21页
        2. 实验方法第21-25页
            2.1 MTT实验第21-22页
            2.2 Hoechst 33342荧光染色方法观察HUVEC凋亡第22页
            2.3 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测HUVEC凋亡第22页
            2.4 荧光显微镜观察HUVEC自噬体第22-23页
            2.5 蛋白质印迹法(Western Blot)检测自噬相关蛋白第23-24页
            2.6 HUVEC内线粒体膜电位的测定第24页
            2.7 HUVEC内ROS测定第24页
            2.8 HUVEC内GSH含量的测定第24-25页
            2.9 激光共聚焦显微镜观察HUVEC溶酶体稳定性第25页
            2.10 统计方法第25页
    (三) 结果第25-39页
        1. 6-姜酚,H_2O_2及自噬诱导剂和抑制剂对HUVEC存活率的影第25-28页
            1.1 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC存活率的影响第25-26页
            1.2 3-MA对HUVEC存活率的影响第26-27页
            1.3 雷帕霉素对HUVEC存活率的影响第27-28页
        2. Hoechst 33342荧光染色方法观察凋亡的结果第28-29页
        3. Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测HUVEC的凋亡第29-30页
        4. 荧光显微镜观察HUVEC的自噬体结果第30-32页
        5. 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC蛋白表达的影响第32-35页
            5.1 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC内LC3-Ⅱ蛋白表达的影响第32页
            5.2 6-姜酚对HUVEC内Bcl-2,Beclin-1蛋白表达的影响第32-34页
            5.3 6-姜酚对HUVEC内mTOR,p-mTOR蛋白表达的影响第34-35页
        6. 激光共聚焦显微镜观察HUVEC溶酶体稳定性第35-36页
        7. 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC内线粒体膜电位水平的影响第36页
        8. 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC内ROS水平的影响第36-38页
        9. 6-姜酚及H_2O_2对HUVEC内GSH水平的影响第38-39页
    (四) 讨论第39-45页
    (五) 结论第45页
    (六) 参考文献第45-51页
第二部分 6-姜酚对过氧化氢致人脐静脉内皮细胞DNA损伤的保护作用第51-68页
    (二) 材料和方法第51-55页
        1. 实验材料第51-52页
            1.1 主要药品与试剂第51页
            1.2 主要仪器第51-52页
            1.3 实验对象第52页
        2. 方法第52-55页
            2.1 单细胞凝胶电泳(SCEG)试验第52-53页
            2.2 ROS含量的测定第53页
            2.3 GSH含量的测定第53页
            2.4 溶酶体膜稳定性的测定第53-54页
            2.5 线粒体膜电位的测定第54页
            2.6 蛋白质印迹法(Western Blot)检测p53蛋白第54-55页
            2.7 统计方法第55页
    (三) 结果第55-60页
        1. 6-姜酚对H_2O_2所致HUVEC的DNA链断裂的影响第55-56页
        2. 6-姜酚对H_2O_2作用于HUVEC产生ROS的影响第56-57页
        3. 6-姜酚对H_2O_2作用于HUVEC产生GSH的影响第57-58页
        4. 6-姜酚对H_2O_2作用于HUVEC后溶酶体膜稳定性的影响第58-59页
        5. 6-姜酚对H_2O_2作用于HUVEC后线粒体膜电位的影响第59页
        6. 6-姜酚对H_2O_2作用于HUVEC后p53蛋白表达的影响第59-60页
    (四) 讨论第60-64页
    (五) 结论第64页
    (六) 参考文献第64-68页
综述第68-83页
    参考文献第76-83页
攻读博士学位期间发表和待发表文章情况第83-84页
致谢第84页

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