摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
·杂交小麦研究概况及存在的问题 | 第14-18页 |
·国内外小麦杂种优势的研究历史 | 第14-15页 |
·小麦杂种优势利用的途径与研究进展 | 第15-18页 |
·杂种小麦研究存在的问题 | 第18页 |
·多子房现象的发现及研究进展 | 第18-23页 |
·多子房小麦的发现与选育 | 第18-19页 |
·多子房小麦的花器官发育 | 第19页 |
·多子房小麦的生化研究 | 第19-20页 |
·多子房小麦的遗传分析 | 第20-21页 |
·多子房小麦的分子标记 | 第21页 |
·多子房小麦的应用价值 | 第21页 |
·其他作物花器官突变现象研究进展 | 第21-23页 |
·抑制消减杂交(SSH)技术及其在植物上的应用 | 第23-28页 |
·SSH 技术原理和操作流程 | 第23-25页 |
·SSH 技术评价 | 第25-26页 |
·SSH 技术在植物中的应用 | 第26-28页 |
·生物信息学在基因研究中的应用 | 第28-30页 |
·序列比对和功能预测 | 第28-29页 |
·基因的电子克隆 | 第29-30页 |
·基因功能验证的主要方法 | 第30-31页 |
·定量PCR 技术 | 第30页 |
·基因体外表达技术 | 第30-31页 |
·反义技术(Antisense technique) | 第31页 |
·RNA 干扰技术(RNA interference,RNAi) | 第31页 |
·研究目的意义及技术路线 | 第31-34页 |
·研究的目的意义 | 第31-32页 |
·研究的技术路线 | 第32-34页 |
第二章 近等基因系多子房性状的评价与新变异类型的发现 | 第34-41页 |
·材料与方法 | 第34-36页 |
·材料 | 第34-36页 |
·外显率(Penetrance) | 第36页 |
·多粒结实率(Maturing rate) | 第36页 |
·发芽率(Percentage germination) | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-39页 |
·小麦多子房新变异类型的发现 | 第36-38页 |
·多子房株系外显率的表现 | 第38页 |
·多子房株系多粒种子结实率的调查 | 第38-39页 |
·小麦多子房NIL 发芽率的测定 | 第39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第三章 小麦多子房性状相关SSH 文库的构建及质量检测 | 第41-54页 |
·材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-49页 |
·小麦幼穗总RNA 提取 | 第41-42页 |
·总RNA 的DNase I 处理 | 第42页 |
·总RNA 浓度、纯度及完整性检测 | 第42页 |
·mRNA 分离纯化及检测 | 第42-43页 |
·SSH 过程 | 第43-46页 |
·连接转化 | 第46-47页 |
·阳性克隆检测 | 第47-48页 |
·质粒提取及酶切 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-52页 |
·小麦幼穗总RNA 质量检测 | 第49页 |
·mRNA 质量检测 | 第49页 |
·cDNA 合成及酶切效果检测 | 第49-50页 |
·SSH 文库的评价 | 第50-51页 |
·蓝白斑筛选结果 | 第51页 |
·阳性克隆筛选结果 | 第51页 |
·部分阳性克隆的质粒提取及酶切结果 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第四章 多子房性状相关ESTs 的生物信息学分析与半定量RT-PCR 验证 | 第54-73页 |
·材料与方法 | 第54-57页 |
·材料 | 第54页 |
·相关cDNA 文库的构建和阳性克隆的获得 | 第54页 |
·序列测定和生物信息学分析 | 第54-55页 |
·半定量RT-PCR 分析 | 第55-57页 |
·结果与分析 | 第57-70页 |
·序列测定及分析 | 第57页 |
·Mu 文库中EST 的比对分析和功能分类 | 第57页 |
·Mo 文库中EST 的比对分析和功能分类 | 第57-64页 |
·两个文库中未知功能EST 序列BLASTn 分析 | 第64-67页 |
·两库比较分析 | 第67-68页 |
·多ⅡNIL 幼穗及其它组织RNA 和cDNA 一链检测 | 第68-69页 |
·部分基因的时空表达分析 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-73页 |
第五章 多子房小麦RPS15a 和RPL21 基因的克隆与分析 | 第73-87页 |
·材料与方法 | 第73-77页 |
·供试材料 | 第73页 |
·RNA 的提取纯化及cDNA 一链的合成 | 第73-74页 |
·DNA 的提取及痕量RNA 去除 | 第74页 |
·电子克隆 | 第74页 |
·RT-PCR 扩增和基因组PCR | 第74-75页 |
·目的片段的回收 | 第75-76页 |
·基因克隆与测序 | 第76-77页 |
·序列分析 | 第77页 |
·时空表达分析 | 第77页 |
·结果与分析 | 第77-85页 |
·小麦RPS15a 基因的克隆与分析 | 第77-80页 |
·小麦RPL21 基因的克隆与分析 | 第80-85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
第六章 小麦多子房性状相关基因Cab 的克隆与表达分析 | 第87-98页 |
·材料与方法 | 第87-90页 |
·材料 | 第87页 |
·RNA 的提取纯化及cDNA 一链的合成 | 第87页 |
·电子克隆 | 第87页 |
·RT-PCR 扩增 | 第87-88页 |
·目的片段的回收、克隆与测序 | 第88页 |
·序列分析 | 第88页 |
·表达分析 | 第88-90页 |
·结果与分析 | 第90-96页 |
·Cab 基因的cDNA 序列分析 | 第90-91页 |
·Cab 基因的氨基酸序列分析 | 第91-96页 |
·Cab 基因的表达分析 | 第96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
第七章 结论 | 第98-101页 |
·本研究结论 | 第98-100页 |
·本研究创新点 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
作者简介 | 第113页 |